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科研人員克隆了豬白細(xì)胞抗原基因(SLA-2基因),構(gòu)建了該基因的真核表達(dá)載體,進(jìn)行了豬腎上皮細(xì)胞表達(dá)研究。實(shí)驗(yàn)的主要流程如圖1,SLA-2基因長度為1100bp,質(zhì)粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點(diǎn)后的數(shù)字表示距復(fù)制原點(diǎn)的距離。請回答:
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限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ
識別序列及切割位點(diǎn) T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
(1)過程①中,PCR擴(kuò)增SLA-2的原理是
DNA復(fù)制
DNA復(fù)制
,下列4種引物中應(yīng)選擇的是
a、b
a、b
。
a  5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b  5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c  5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d  5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
(2)過程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是
擴(kuò)增重組DNA分子
擴(kuò)增重組DNA分子
,該過程需要用
Ca2+
Ca2+
處理大腸桿菌,使其成為感受態(tài)細(xì)胞。然后將大腸桿菌涂布在含有
氨芐青霉素
氨芐青霉素
(抗生素)的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
(3)若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳,請在答題紙相應(yīng)位置畫出可能得到的電泳條帶。
(4)科研中常用呤霉素對真核細(xì)胞進(jìn)行篩選,一般選擇最低致死濃度的前一個濃度作為篩選濃度的原因是:既可以讓大部分沒有抗性的細(xì)胞死亡又不會讓
具有抗性的細(xì)胞死亡
具有抗性的細(xì)胞死亡
。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果最佳的嘌霉素篩選濃度為
80ug/mL
80ug/mL
。
(5)過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細(xì)胞生產(chǎn)的抗原肽,其原理是
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
,單克隆抗體能檢測其是否具有正確的
抗原肽
抗原肽
,從而是否具有生物活性。
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【答案】DNA復(fù)制;a、b;擴(kuò)增重組DNA分子;Ca2+;氨芐青霉素;具有抗性的細(xì)胞死亡;80ug/mL;抗原-抗體雜交;抗原肽
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:41引用:3難度:0.6
相似題
  • 1.PCR技術(shù)在分子生物學(xué),臨床醫(yī)學(xué)、考古學(xué)等眾多領(lǐng)域取得了巨大成就,當(dāng)前新冠病毒核酸檢測就需要借助PCR技術(shù)。據(jù)此回答下列問題。
    (1)PCR擴(kuò)增的第一步是使目的基因DNA受熱變性,DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
     
    。進(jìn)行PCR時一般需要加入4種脫氧核苷三磷酸(dNTP),其作用是
     
    。
    (2)新冠病毒是一種RNA病毒,檢測新冠病毒RNA(核酸檢測)可以采取“熒光RT-PCR法”,該過程中需要用到的酶有
     
    。采集到的樣本要迅速進(jìn)行病毒滅活處理,其目的是
     
    。
    (3)擴(kuò)增后的核酸通過熒光標(biāo)記的基因探針進(jìn)行檢測,理論上,在檢測過程中,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說明檢測結(jié)果呈
     
    (填陰或陽)性,此時可進(jìn)一步檢測疑似患者血漿中的
     
    進(jìn)行確診,原因是
     
    。
    (4)目前接種疫苗是預(yù)防新冠疫情最有效的措施,分析利用PCR技術(shù)制備新冠病毒疫苗的主要思路:
     
    (答出1種情況即可)。

    發(fā)布:2024/11/19 13:30:2組卷:5引用:3難度:0.5
  • 2.中國科學(xué)家采集了某深海海域的沉積物樣品,分離、鑒定得到其中的深海放線菌,以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題:
    (1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究,取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng),稀釋后取菌液通過
     
    法接種到高氏一號(加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚)培養(yǎng)基表面以獲得
     
    。培養(yǎng)基中的酚能抑制細(xì)菌等雜菌的生長,而放線菌能在該培養(yǎng)基上正常生長,這種培養(yǎng)基屬于
     
    培養(yǎng)基。
    (2)通過PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是
     
    ,在PCR反應(yīng)緩沖液中通常要加入
     
    ,以激活該酶。
    (3)PCR能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是
     
    。PCR的產(chǎn)物一般可通過
     
    鑒定。

    發(fā)布:2024/11/18 2:30:1組卷:3引用:2難度:0.5
  • 3.PCR技術(shù)是對體內(nèi)DNA復(fù)制過程的模仿,在基因診斷等許多方面發(fā)揮重要作用。其機(jī)理模式如圖所示,①②③表示DNA上的相關(guān)區(qū)段,abcd分別為引物的兩端?,F(xiàn)利用該技術(shù)擴(kuò)增片段②,下列描述中正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)?

    發(fā)布:2024/11/17 22:30:1組卷:9引用:1難度:0.7
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