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菁優(yōu)網(wǎng)H18雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過程中的凋亡現(xiàn)象制約著生產(chǎn)能力的提高.通過基因工程可改造H18雜交瘤細(xì)胞的抗凋亡能力,相關(guān)步驟如下:
①細(xì)胞培養(yǎng):將人肝癌細(xì)胞在含10%小牛血清的培養(yǎng)液中培養(yǎng).一段時間后,用胰蛋白酶處理培養(yǎng)液,漂洗后調(diào)整細(xì)胞懸液濃度為1×107個?mL-1
②免疫小鼠:向小鼠體內(nèi)注射肝癌細(xì)胞懸液0.8mL,以后每隔2周免疫1次,共3次,最后一次免疫后3天,取脾臟制成細(xì)胞懸液備用.
③細(xì)胞融合及篩選:將脾臟細(xì)胞懸液和骨髓瘤細(xì)胞懸液在50%PEG作用下進(jìn)行融合,篩選出能產(chǎn)生抗人肝癌單克隆抗體HAb18的H18雜交瘤細(xì)胞.
④改造H18雜交瘤細(xì)胞:利用PCR技術(shù)獲得小鼠的bcl-XL基因(抗凋亡基因),構(gòu)建表達(dá)載體,通過脂質(zhì)體法導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞,再篩選出抗凋亡能力明顯提高的H18雜交瘤細(xì)胞.
請分析回答:
(1)步驟①肝癌細(xì)胞合成培養(yǎng)液中特有的成分是
血清(血清、血漿)
血清(血清、血漿)
,培養(yǎng)液中還需加入一定量抗生素的目的是
防止雜菌污染
防止雜菌污染

(2)步驟②中,肝癌細(xì)胞免疫小鼠需在一定時間內(nèi)間隔注射3次,其目的是
刺激小鼠產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞
刺激小鼠產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞

(3)步驟③中,除了用50%PEG促進(jìn)細(xì)胞融合外,常用的生物誘導(dǎo)因素是
滅活的病毒
滅活的病毒
,物理誘導(dǎo)方法有
電刺激(振蕩或離心)
電刺激(振蕩或離心)
(寫出一種即可).步驟④中通過脂質(zhì)體法能將表達(dá)載體導(dǎo)入H18雜交瘤細(xì)胞依賴的原理是
膜的流動性
膜的流動性

(4)與普通抗肝癌藥物相比,用抗人肝癌單克隆抗體HAb18與相應(yīng)抗癌藥物結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”治療肝癌的主要優(yōu)點是
能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位,減少對正常細(xì)胞的傷害,減少用藥劑量
能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位,減少對正常細(xì)胞的傷害,減少用藥劑量

(5)乙醇有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用.為了建立H18雜交瘤細(xì)胞凋亡檢測模型,科研人員利用不同濃度的乙醇溶液誘導(dǎo)H18雜交瘤細(xì)胞凋亡,其結(jié)果如圖所示.抗凋亡細(xì)胞株的建立與篩選應(yīng)選擇的誘導(dǎo)條件是
C
C
(用圖中字母表示).

【答案】血清(血清、血漿);防止雜菌污染;刺激小鼠產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞;滅活的病毒;電刺激(振蕩或離心);膜的流動性;能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位,減少對正常細(xì)胞的傷害,減少用藥劑量;C
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:13引用:3難度:0.3
相似題
  • 1.為實現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點,制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
    (1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應(yīng)提取
     
    區(qū)基因序列用于設(shè)計抗原。
    (2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
     
    細(xì)胞,誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合,利用
     
    篩選得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測,多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,最終通過體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
    (3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
    菁優(yōu)網(wǎng)
    由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
     
    。
    (4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6
  • 2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊對鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨與抗原作用時對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時F′對抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是(  )菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5
  • 3.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實驗材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實驗流程。下列敘述錯誤的是(  )
    菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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