為實現(xiàn)對肝癌的有效治療，研究人員通過比較肝腫瘤細胞和正常細胞間的差異，篩選有效的免疫治療靶點，制備相應單克隆抗體并構建抗體—藥物偶聯(lián)物。
（1）檢測發(fā)現(xiàn)細胞的CLDN6蛋白能夠促進腫瘤發(fā)生，選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白，包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內區(qū)，制備免疫小鼠所用的抗原時，應提取

胞外

胞外

區(qū)基因序列用于設計抗原。
（2）將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內，從該小鼠脾臟中獲取

（能產生特定抗體的）B淋巴

（能產生特定抗體的）B淋巴

細胞，誘導其與骨髓瘤細胞融合，利用

特定選擇培養(yǎng)基

特定選擇培養(yǎng)基

篩選得到雜交瘤細胞，經克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測，多次篩選得到產生單克隆抗體的雜交瘤細胞，最終通過體內或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
（3）將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結合構建抗體—藥物偶聯(lián)物（CLDN6-DMI）。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI（無關抗體-DMI）分別處理高表達CLDN6細胞和低表達CLDN6細胞，檢測細胞活力，結果如圖1：

由圖可知，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞，依據(jù)是

與低表達CLDN6細胞相比，隨CLDN6-DMI處理濃度的升高，高表達CLDN6細胞活力下降幅度大

與低表達CLDN6細胞相比，隨CLDN6-DMI處理濃度的升高，高表達CLDN6細胞活力下降幅度大

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（4）如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機制：由圖分析，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞的原因是

CLDN6-DMI與高表達CLDN6細胞上的CLDN6蛋白特異性結合的多，進入細胞中，通過溶酶體裂解，將DMI 釋放出來發(fā)揮作用

CLDN6-DMI與高表達CLDN6細胞上的CLDN6蛋白特異性結合的多，進入細胞中，通過溶酶體裂解，將DMI 釋放出來發(fā)揮作用

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