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當(dāng)前位置： 2021年山東省高考生物模擬試卷> 試題詳情

科學(xué)家將人的生長素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。過程如圖1據(jù)圖回答：

（1）過程①表示的是采取

反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）（從CDNA文庫中獲?。?/div>

反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）（從CDNA文庫中獲?。?/div>的方法來獲取目的基因。其過程可表示為：目的基因

轉(zhuǎn)錄

mRNA

逆轉(zhuǎn)錄

單鏈DNA

互補(bǔ)合成

雙鏈DNA
（2）人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，原因是

人的基因與大腸桿菌DNA的組成成分相同，結(jié)構(gòu)相同，并且具有相同的黏性末端

。
（3）圖中（3）過程用人工方法，使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi)，主要是借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。一般將受體大腸桿菌用

Ca²⁺

處理，使細(xì)胞處于能吸收周圍環(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為

感受態(tài)

細(xì)胞，再將表達(dá)載體溶于緩沖液中與這種細(xì)胞混合，在一定的溫度下完成轉(zhuǎn)化。
（4）檢測大腸桿菌B是否導(dǎo)入了質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒，可采用的方法是

將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的，說明已導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒，反之則沒有導(dǎo)入

。
（5）蛋白質(zhì)工程中，直接需要進(jìn)行操作的對象是

。
A．氨基酸結(jié)構(gòu)
B．蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)
C．肽鏈結(jié)構(gòu)
D．基因結(jié)構(gòu)
為擴(kuò)大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。
（6）獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖2中的

處（填“a”或“b”）。
（7）將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和

基因槍法（花粉管通道法）

法。
（8）為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的

耐鹽基因（目的基因）

作探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用

一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）

方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。
（9）下列屬于PCR技術(shù)的條件的是

。
①單鏈的脫氧核苷酸序列引物
②目的基因所在的DNA片段
③脫氧核苷酸
④核糖核苷酸
⑤DNA連接酶
⑥D(zhuǎn)NA聚合酶
⑦DNA限制性內(nèi)切酶
A．①②③⑤
B．①②③⑤⑦
C．①②③⑥
D．①②④⑤⑦

【考點】基因工程的操作過程綜合．

【答案】反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）（從CDNA文庫中獲取）；人的基因與大腸桿菌DNA的組成成分相同，結(jié)構(gòu)相同，并且具有相同的黏性末端；Ca²⁺；感受態(tài)；將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的，說明已導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒，反之則沒有導(dǎo)入；D；a；基因槍法（花粉管通道法）；耐鹽基因（目的基因）；一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）；C

【解答】

【點評】

聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。

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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：269引用：2難度：0.6

相似題

1．某動物體內(nèi)含有研究者感興趣的目的基因，研究者欲將該基因?qū)氪竽c桿菌的質(zhì)粒中保存。該質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因（AmpR）、LacZ基因及一些酶切位點，其結(jié)構(gòu)和簡單的操作步驟如圖所示。回答下列問題：

（1）制備重組質(zhì)粒常用同種限制酶的原因是能產(chǎn)生

。為了使質(zhì)粒DNA與目的基因能連接形成重組質(zhì)粒，還需要在混合物中加

。
（2）培養(yǎng)基中除了加入大腸桿菌所必需的營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加

以便篩選導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌。
（3）為了使大腸桿菌處于一種能

的生理狀態(tài)，一般先用Ca²⁺處理大腸桿菌細(xì)胞。
（4）將質(zhì)粒和目的基因的混合物與上述處理后的大腸桿菌混勻，制備轉(zhuǎn)基因大腸桿菌，取0.1ml上述溶液采用

法接種于培養(yǎng)基表面，在37℃下倒置培養(yǎng)16 h。經(jīng)培養(yǎng)后，分別統(tǒng)計轉(zhuǎn)目的基因大腸桿菌的菌落數(shù)和總菌落數(shù)，并計算轉(zhuǎn)化效率。理論上轉(zhuǎn)目的基因受體菌的菌落呈現(xiàn)

色，原因是

。實驗中實際轉(zhuǎn)化效率介于50%～85.7%，原因是

。
發(fā)布：2024/9/15 3:0:8組卷：1引用：2難度：0.6
解析
2．HSV-1是單純皰疹病毒的一種類型，HSV-1病毒顆粒的組裝主要由包裝信號序列（a′）介導(dǎo)?？蒲腥藛T從HSV-1基因組中分離出a′，利用基因工程技術(shù)構(gòu)建了質(zhì)粒pHSL并進(jìn)行了相關(guān)實驗，流程如圖1。請回答下列問題。

注：LacZ的表達(dá)產(chǎn)物β-半乳糖苷酶能將無色化合物X-gal水解產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)而使細(xì)胞變藍(lán)
（1）過程①先用

酶將HSV-1的DNA酶解成若干片段，再利用

與含有a′的酶解片段進(jìn)行雜交，根據(jù)陽性信號逐步篩選出盡可能短的a′所在片段。
（2）過程②中使用的限制酶是

。過程③采用的方法是

。過程④在轉(zhuǎn)染、培養(yǎng)Vero細(xì)胞時，常在培養(yǎng)液中添加動物血清，其目的是

。
（3）tsK株是具有感染性的HSV-1溫度敏感株。在tsK株的輔助下，pHSL能組裝成假病毒（不含完整病毒基因組的顆粒），從而獲得tsK株和含假病毒的混合毒株。圖2是Vero細(xì)胞連續(xù)傳代過程中，混合毒株的滴度（代表單位體積液體中病毒顆粒的多少）變化曲線及每代中假病毒的占比（柱形圖）。
①研究中，選用

代混合毒株用于后續(xù)神經(jīng)細(xì)胞的接種實驗可減少tsK株可能造成的細(xì)胞毒性，理由是

。
②為驗證假病毒能否感染體外培養(yǎng)的神經(jīng)細(xì)胞并表達(dá)LacZ基因，科研人員將混合毒株與大鼠神經(jīng)細(xì)胞按一定比例在

℃下混合培養(yǎng)48h,用含

（物質(zhì)）的檢測液檢測發(fā)現(xiàn)大約20%的細(xì)胞變藍(lán)，說明

。
發(fā)布：2024/9/16 0:0:8組卷：4引用：2難度：0.6
解析
3．癌細(xì)胞表面蛋白“PDL-1”與T細(xì)胞表面蛋白“PD-1”特異性結(jié)合后，可抑制T細(xì)胞活性并啟動其凋亡程序，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進(jìn)行克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性鑒定，為制備抗體打基礎(chǔ)。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1，幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：

（1）首先提取細(xì)胞中的mRNA逆轉(zhuǎn)錄生成cDNA作為模板：設(shè)計含有不同的限制酶切位點的α和β序列為引物，通過

技術(shù)擴(kuò)增目的基因。
（2）為保證目的基因和載體正向連接，選用圖中的名稱為

的限制酶將質(zhì)粒和目的基因進(jìn)行切割，再用DNA連接酶構(gòu)建表達(dá)載體。該表達(dá)載體的組成，除了目的基因、標(biāo)記基因（抗卡那霉素基因）外，還必須具有

等（寫出2點即可）。
（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過Ca²⁺處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含

培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉(zhuǎn)化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴(kuò)增重組DNA。
（4）將擴(kuò)增后的“載體A/PD-1重組DNA”轉(zhuǎn)入可高度表達(dá)外源基因的原代293T細(xì)胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達(dá)，檢測細(xì)胞膜表面是否具有

。研究中還會有一步驟是只將載體A轉(zhuǎn)入293T細(xì)胞，其目的是

。
發(fā)布：2024/9/17 0:0:8組卷：28引用：5難度：0.6
解析

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