人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大，通常從人血中提取。但由于艾滋病病毒（HIV）等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對(duì)血液制品顧慮重重。圖一是以基因工程技術(shù)獲取HSA的兩條途徑，其中報(bào)告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。圖二為HSA基因兩側(cè)的核苷酸序列。圖三為相關(guān)限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)。據(jù)圖回答下列問題：
（1）基因工程的核心步驟是 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建，完成過程②所需要技術(shù)手段是 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)。
（2）采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因，根據(jù)其兩端序列，則需要設(shè)計(jì)的引物序列是 引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′，引物Ⅱ是3′-GTAAGTTAAGAG-5′引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′，引物Ⅱ是3′-GTAAGTTAAGAG-5′。
（3）依據(jù)圖一、圖二和圖三分析，成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒用酶C處理將得到 22個(gè)DNA片段。
（4）圖一過程①中需將植物細(xì)胞與 農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓 T-DNAT-DNA整合到植物細(xì)胞染色體DNA上，除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含 物質(zhì)K物質(zhì)K的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。
（5）過程④前對(duì)卵細(xì)胞供體母牛進(jìn)行 超數(shù)排卵超數(shù)排卵處理。過程通常將受精卵培養(yǎng)至 桑葚胚或囊胚桑葚胚或囊胚階段。過程⑤鑒定胚胎性別時(shí)常取 滋養(yǎng)層滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析。
（6）為檢測HSA基因的表達(dá)情況，可提取受體細(xì)胞的 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)，用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。
【答案】基因表達(dá)載體的構(gòu)建；植物組織培養(yǎng)；引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′，引物Ⅱ是3′-GTAAGTTAAGAG-5′；2；農(nóng)桿菌；T-DNA；物質(zhì)K；超數(shù)排卵；桑葚胚或囊胚；滋養(yǎng)層；蛋白質(zhì)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：21引用：2難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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