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基因X的表達(dá)產(chǎn)物可保護(hù)損傷的神經(jīng)細(xì)胞??茖W(xué)家構(gòu)建了含X的基因表達(dá)載體(圖1),并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中,用于干細(xì)胞基因治療的研究。請(qǐng)據(jù)此回答下列問題:
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(1)構(gòu)建含X的基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)選擇圖1中的
BamHⅠ
BamHⅠ
限制酶。
(2)酶切后的載體和基因X進(jìn)行連接,可產(chǎn)生3種連接產(chǎn)物:單個(gè)載體自連,基因X與載體正向連接、基因X與載體反向連接(如圖1所示)。為鑒定這3種產(chǎn)物,選擇EcoRI酶和HindHⅢ酶對(duì)篩選得到的載體進(jìn)行雙酶切,并對(duì)酶切后的DNA片段進(jìn)行電泳分析,結(jié)果如圖2所示。圖中1、2、3泳道分別對(duì)應(yīng)的載體的連接方式是
載體自連
載體自連
、
反向連接
反向連接
正向連接
正向連接
。
(3)在培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的過程中,可使用
胰蛋白酶或膠原蛋白
胰蛋白酶或膠原蛋白
酶將細(xì)胞分散開。分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為
細(xì)胞貼壁
細(xì)胞貼壁
。
(4)將正向連接的重組載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后,為了檢測(cè)基因X是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,可用
分子雜交
分子雜交
技術(shù)。當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí),需進(jìn)行
傳代
傳代
培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞,用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】BamHⅠ;載體自連;反向連接;正向連接;胰蛋白酶或膠原蛋白;細(xì)胞貼壁;分子雜交;傳代
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:14引用:1難度:0.7
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  • 1.紅細(xì)胞生成素(EPO)是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白,可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限,某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器,使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
  • 2.煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一,提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種,抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程(①~⑤)如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項(xiàng))等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號(hào))。過程②③采用的方法是
     

    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
  • 3.如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn),如圖為某種質(zhì)粒和目的基因,箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)。現(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中,以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是(  )
    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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