1．紅豆杉富含紫杉醇，是一種重要的抗癌藥物。請回答與紅豆杉組織培養(yǎng)及轉(zhuǎn)基因有關(guān)的問題：
（1）在進行紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)時，最好取春季新長出的莖葉，經(jīng)處理后才能接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。形成的愈傷組織細胞在顯微鏡下觀察通常是不定形態(tài)的，原因是。為增加愈傷組織的數(shù)量，可以將培養(yǎng)瓶中的愈傷組織切下，接種至新的相同培養(yǎng)基上進行。
（2）可從固體培養(yǎng)基中篩選生長良好的愈傷組織，接種至含液體培養(yǎng)基的三角瓶中在搖床上振蕩培養(yǎng)，細胞的生長速度和紫杉醇含量和培養(yǎng)的溫度、pH、光照條件、培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)及細胞遺傳特性有關(guān)外，還受的影響。在植物細胞不斷再培養(yǎng)的過程中容易發(fā)生（可遺傳變異類型）等變化，這會導(dǎo)致細胞全能性的喪失。
（3）將外源基因?qū)胫参锛毎卸喾N途徑：以經(jīng)改造的農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒為，通過寄主感染受體植物的途徑將外源基因轉(zhuǎn)入受體細胞；也可通過將外源基因直接導(dǎo)入受體細胞；還可以將外源DNA包裹在人工合成的脂質(zhì)體中，通過與融合完成細胞的轉(zhuǎn)化。

2．回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題：
HIV感染已成為威脅人類健康及社會發(fā)展的主要問題之一，臨床實驗證實，HIV殼體蛋白病毒樣顆粒能夠刺激機體產(chǎn)生特異的體液和細胞免疫。植物表達系統(tǒng)屬于真核細胞表達系統(tǒng)，利用植物生產(chǎn)重組蛋白具有很多優(yōu)點，包括：降低攜帶動物性病原體的危險性，易于純化，不需特殊的運輸和儲藏條件，植物培養(yǎng)基價格低廉降低生產(chǎn)成本等，因此被認為是一個比微生物或動物更理想的蛋白生產(chǎn)系統(tǒng)?？茖W(xué)家們將經(jīng)過改造的融合基因轉(zhuǎn)入枸杞細胞，建立利用轉(zhuǎn)基因枸杞根系分泌表達特定HIV殼體蛋白的反應(yīng)系統(tǒng)。
（1）通過長期研究后，科學(xué)家已經(jīng)測定該融合基因的堿基序列，下面為利用PCR儀進行PCR的操作步驟請完善相關(guān)步驟內(nèi)容。
a.按配方準備好各組分。
b.用微量移液器依次加入各組分。
c.進行，使反應(yīng)液集中在微量離心管底部。
（2）若采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入目的基因，需先將融合基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的中，再通過農(nóng)桿菌的侵染將重組DNA分子轉(zhuǎn)入枸杞細胞中。此過程中影響轉(zhuǎn)化效率的因素除了溫度、培養(yǎng)時間等環(huán)境因素外還有、。（答出2點即可）將成功導(dǎo)入目的基因的枸杞細胞進行植物組織培養(yǎng)前需將其轉(zhuǎn)入添加的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以除去附著的農(nóng)桿菌。枸杞根系分泌表達HIV殼體蛋白的缺點是根系的生長較為緩慢，為了獲得大量表達產(chǎn)物，可以對相應(yīng)細胞進行。
（3）枸杞植株在多次繼代培養(yǎng)后可能會喪失細胞全能性的表達能力，可能是由于細胞或組織中的被打破，或細胞對發(fā)生改變。

3．雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細胞因子，廣泛用于動物領(lǐng)域的抗病毒治療?？蒲腥藛T將雞干擾素基因作為目的基因，構(gòu)建重組質(zhì)粒，導(dǎo)入煙草，以獲得抗病毒煙草?；卮饐栴}：
（1）已知雞干擾素基因的核苷酸序列，則可采用方法獲得目的基因，對其進行克隆常采用技術(shù)。
（2）重組質(zhì)粒中應(yīng)有RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，該部位稱為。
（3）由于細胞壁的存在，植物的組織培養(yǎng)和克隆有一定的難度，故常用（方法）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入煙草細胞的，再進行培養(yǎng)。待重新長出細胞壁，形成胚性細胞，此時，應(yīng)該培養(yǎng)基中甘露醇的濃度，以利于胚性細胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細胞團，然后經(jīng)兩條途徑形成轉(zhuǎn)基因煙草植株。該轉(zhuǎn)基因煙草植株在多次繼代培養(yǎng)后，會（“保持”或“喪失”）細胞全能性的表達。
（4）若轉(zhuǎn)基因煙草植株對病毒的侵染表現(xiàn)出一定的抗性，但抗性較低，可能原因是。