回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題：
HIV感染已成為威脅人類健康及社會發(fā)展的主要問題之一，臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí)，HIV殼體蛋白病毒樣顆粒能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生特異的體液和細(xì)胞免疫。植物表達(dá)系統(tǒng)屬于真核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，利用植物生產(chǎn)重組蛋白具有很多優(yōu)點(diǎn)，包括：降低攜帶動物性病原體的危險性，易于純化，不需特殊的運(yùn)輸和儲藏條件，植物培養(yǎng)基價格低廉降低生產(chǎn)成本等，因此被認(rèn)為是一個比微生物或動物更理想的蛋白生產(chǎn)系統(tǒng)。科學(xué)家們將經(jīng)過改造的融合基因轉(zhuǎn)入枸杞細(xì)胞，建立利用轉(zhuǎn)基因枸杞根系分泌表達(dá)特定HIV殼體蛋白的反應(yīng)系統(tǒng)。
（1）通過長期研究后，科學(xué)家已經(jīng)測定該融合基因的堿基序列，下面為利用PCR儀進(jìn)行PCR的操作步驟請完善相關(guān)步驟內(nèi)容。
a.按配方準(zhǔn)備好各組分。
b.用微量移液器依次加入各組分。
c.進(jìn)行，使反應(yīng)液集中在微量離心管底部。
（2）若采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入目的基因，需先將融合基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的中，再通過農(nóng)桿菌的侵染將重組DNA分子轉(zhuǎn)入枸杞細(xì)胞中。此過程中影響轉(zhuǎn)化效率的因素除了溫度、培養(yǎng)時間等環(huán)境因素外還有、。（答出2點(diǎn)即可）將成功導(dǎo)入目的基因的枸杞細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)前需將其轉(zhuǎn)入添加的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以除去附著的農(nóng)桿菌。枸杞根系分泌表達(dá)HIV殼體蛋白的缺點(diǎn)是根系的生長較為緩慢，為了獲得大量表達(dá)產(chǎn)物，可以對相應(yīng)細(xì)胞進(jìn)行。
（3）枸杞植株在多次繼代培養(yǎng)后可能會喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力，可能是由于細(xì)胞或組織中的被打破，或細(xì)胞對發(fā)生改變。

【考點(diǎn)】細(xì)胞工程的原理——細(xì)胞的全能性．

【答案】離心；控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的基因；農(nóng)桿菌的種類、數(shù)量；受體細(xì)胞的基因型；抗生素；液體懸浮培養(yǎng)；激素平衡；外源生長物質(zhì)的敏感性