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雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細(xì)胞因子,廣泛用于動(dòng)物領(lǐng)域的抗病毒治療??蒲腥藛T將雞干擾素基因作為目的基因,構(gòu)建重組質(zhì)粒,導(dǎo)入煙草,以獲得抗病毒煙草?;卮饐?wèn)題:
(1)已知雞干擾素基因的核苷酸序列,則可采用
人工合成
人工合成
方法獲得目的基因,對(duì)其進(jìn)行克隆常采用
PCR
PCR
技術(shù)。
(2)重組質(zhì)粒中應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,該部位稱(chēng)為
啟動(dòng)子
啟動(dòng)子
。
(3)由于細(xì)胞壁的存在,植物的組織培養(yǎng)和克隆有一定的難度,故常用
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
(方法)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入煙草細(xì)胞的
原生質(zhì)體
原生質(zhì)體
,再進(jìn)行培養(yǎng)。待重新長(zhǎng)出細(xì)胞壁,形成胚性細(xì)胞,此時(shí),應(yīng)該
降低
降低
培養(yǎng)基中甘露醇的濃度,以利于胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán),然后經(jīng)兩條途徑形成轉(zhuǎn)基因煙草植株。該轉(zhuǎn)基因煙草植株在多次繼代培養(yǎng)后,會(huì)
保持
保持
(“保持”或“喪失”)細(xì)胞全能性的表達(dá)。
(4)若轉(zhuǎn)基因煙草植株對(duì)病毒的侵染表現(xiàn)出一定的抗性,但抗性較低,可能原因是
轉(zhuǎn)基因煙草體內(nèi)干擾素的合成量較低
轉(zhuǎn)基因煙草體內(nèi)干擾素的合成量較低

【答案】人工合成;PCR;啟動(dòng)子;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;原生質(zhì)體;降低;保持;轉(zhuǎn)基因煙草體內(nèi)干擾素的合成量較低
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:28引用:1難度:0.7
相似題
  • 1.紅豆杉富含紫杉醇,是一種重要的抗癌藥物。請(qǐng)回答與紅豆杉組織培養(yǎng)及轉(zhuǎn)基因有關(guān)的問(wèn)題:
    (1)在進(jìn)行紅豆杉愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)時(shí),最好取春季新長(zhǎng)出的莖葉,經(jīng)
     
    處理后才能接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。形成的愈傷組織細(xì)胞在顯微鏡下觀察通常是不定形態(tài)的,原因是
     
    。為增加愈傷組織的數(shù)量,可以將培養(yǎng)瓶中的愈傷組織切下,接種至新的相同培養(yǎng)基上進(jìn)行
     
    。
    (2)可從固體培養(yǎng)基中篩選生長(zhǎng)良好的愈傷組織,接種至含液體培養(yǎng)基的三角瓶中在搖床上振蕩培養(yǎng),細(xì)胞的生長(zhǎng)速度和紫杉醇含量和培養(yǎng)的溫度、pH、光照條件、培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及細(xì)胞遺傳特性有關(guān)外,還受
     
    的影響。在植物細(xì)胞不斷再培養(yǎng)的過(guò)程中容易發(fā)生
     
    (可遺傳變異類(lèi)型)等變化,這會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞全能性的喪失。
    (3)將外源基因?qū)胫参锛?xì)胞有多種途徑:以經(jīng)改造的農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒為
     
    ,通過(guò)寄主感染受體植物的途徑將外源基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞;也可通過(guò)
     
    將外源基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞;還可以將外源DNA包裹在人工合成的脂質(zhì)體中,通過(guò)與
     
    融合完成細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。

    發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:26引用:1難度:0.7
  • 2.某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí),列表比較了動(dòng)植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容,你認(rèn)為有幾處不正確( ?。?br />
    植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程
    技術(shù)手段植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交等動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和融合等
    特殊處理酶解法去除細(xì)胞壁胃蛋白酶處理得到細(xì)胞懸浮液
    融合方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法物理方法、化學(xué)方法和生物方法
    典型應(yīng)用無(wú)病毒植物的培育、人工種子、種間植物雜交等單克隆抗體的制備等
    培養(yǎng)基區(qū)別所用的糖必須為葡萄糖所用的糖為葡萄糖且動(dòng)物血清不可缺少

    發(fā)布:2024/5/27 14:0:0組卷:14引用:4難度:0.7
  • 3.回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題:
    HIV感染已成為威脅人類(lèi)健康及社會(huì)發(fā)展的主要問(wèn)題之一,臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí),HIV殼體蛋白病毒樣顆粒能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生特異的體液和細(xì)胞免疫。植物表達(dá)系統(tǒng)屬于真核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),利用植物生產(chǎn)重組蛋白具有很多優(yōu)點(diǎn),包括:降低攜帶動(dòng)物性病原體的危險(xiǎn)性,易于純化,不需特殊的運(yùn)輸和儲(chǔ)藏條件,植物培養(yǎng)基價(jià)格低廉降低生產(chǎn)成本等,因此被認(rèn)為是一個(gè)比微生物或動(dòng)物更理想的蛋白生產(chǎn)系統(tǒng)??茖W(xué)家們將經(jīng)過(guò)改造的融合基因轉(zhuǎn)入枸杞細(xì)胞,建立利用轉(zhuǎn)基因枸杞根系分泌表達(dá)特定HIV殼體蛋白的反應(yīng)系統(tǒng)。
    (1)通過(guò)長(zhǎng)期研究后,科學(xué)家已經(jīng)測(cè)定該融合基因的堿基序列,下面為利用PCR儀進(jìn)行PCR的操作步驟請(qǐng)完善相關(guān)步驟內(nèi)容。
    a.按配方準(zhǔn)備好各組分。
    b.用微量移液器依次加入各組分。
    c.進(jìn)行
     
    ,使反應(yīng)液集中在微量離心管底部。
    (2)若采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入目的基因,需先將融合基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的
     
    中,再通過(guò)農(nóng)桿菌的侵染將重組DNA分子轉(zhuǎn)入枸杞細(xì)胞中。此過(guò)程中影響轉(zhuǎn)化效率的因素除了溫度、培養(yǎng)時(shí)間等環(huán)境因素外還有
     
    、
     
    。(答出2點(diǎn)即可)將成功導(dǎo)入目的基因的枸杞細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)前需將其轉(zhuǎn)入添加
     
    的培養(yǎng)基中培養(yǎng),以除去附著的農(nóng)桿菌。枸杞根系分泌表達(dá)HIV殼體蛋白的缺點(diǎn)是根系的生長(zhǎng)較為緩慢,為了獲得大量表達(dá)產(chǎn)物,可以對(duì)相應(yīng)細(xì)胞進(jìn)行
     
    。
    (3)枸杞植株在多次繼代培養(yǎng)后可能會(huì)喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力,可能是由于細(xì)胞或組織中的
     
    被打破,或細(xì)胞對(duì)
     
    發(fā)生改變。

    發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:25引用:1難度:0.7
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