30.雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細胞因子,廣泛用于動物領(lǐng)域的抗病毒治療??蒲腥藛T將雞干擾素基因作為目的基因,構(gòu)建重組質(zhì)粒,導(dǎo)入煙草,以獲得抗病毒煙草?;卮饐栴}:
(1)已知雞干擾素基因的核苷酸序列,則可采用
方法獲得目的基因,對其進行克隆常采用
技術(shù)。
(2)重組質(zhì)粒中應(yīng)有RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,該部位稱為
。
(3)由于細胞壁的存在,植物的組織培養(yǎng)和克隆有一定的難度,故常用
(方法)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入煙草細胞的
,再進行培養(yǎng)。待重新長出細胞壁,形成胚性細胞,此時,應(yīng)該
培養(yǎng)基中甘露醇的濃度,以利于胚性細胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細胞團,然后經(jīng)兩條途徑形成轉(zhuǎn)基因煙草植株。該轉(zhuǎn)基因煙草植株在多次繼代培養(yǎng)后,會
(“保持”或“喪失”)細胞全能性的表達。
(4)若轉(zhuǎn)基因煙草植株對病毒的侵染表現(xiàn)出一定的抗性,但抗性較低,可能原因是
。