24.人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價(jià)值??蒲腥藛T通過生物工程技術(shù)獲得轉(zhuǎn)HSA 基因奶牛,并通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)HSA,其主要技術(shù)流程如圖1所示。請分析并回答下列問題:
(1)圖1中為獲取大量的去核卵母細(xì)胞,往往需對相應(yīng)母牛使用
處理,使其超數(shù)排卵,收集并選取處在
時(shí)期的卵母細(xì)胞,通過顯微操作去除細(xì)胞核。供核的牛胎兒成纖維細(xì)胞通常選用傳代 10 代以內(nèi)的細(xì)胞,其原因是
。
(2)胚胎移植時(shí),為使代孕母牛能處于適合的生理狀態(tài),需要用激素對其進(jìn)行
處理。為獲得更多轉(zhuǎn)基因母牛,可在胚胎移植前對胚胎進(jìn)行
。
(3)SRY-PCR法性別鑒定的基本程序是:提取牛胎兒成纖維細(xì)胞的DNA,經(jīng)PCR 反應(yīng)體系擴(kuò)增SRY基因(Y 染色體上特有的性別決定基因)片段,然后對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測。
①PCR反應(yīng)體系中通常含有模板DNA、引物、Taq酶、
、緩沖液等。根據(jù)SRY基因序列設(shè)計(jì)的引物長度一般為20~24個(gè)核苷酸,其不宜過短的原因主要是
,兩種引物中G+C的含量相差不宜過大,原因主要是
。
②PCR 一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為變性、
和延伸三步。在循環(huán)之前,常要進(jìn)行一次預(yù)變性,其目的是
。
③細(xì)胞核內(nèi)DNA的復(fù)制過程如圖2 所示,其中有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰拿撗鹾塑账徭溒危ǚQ為岡崎片段),再形成較長的分子,而在PCR過程中無岡崎片段形成的原因是
。
④若擴(kuò)增產(chǎn)物含大量SRY基因片段,則該種牛胎兒成纖維細(xì)胞
(填“能”或“不能”)用作技術(shù)流程中轉(zhuǎn)化過程的受體細(xì)胞。