64．2019-nCoV（2019新型冠狀病毒）是一類具有囊膜的+RNA病毒，基因組編碼多種蛋白質，其中有4種主要結構蛋白：S蛋白（刺突糖蛋白，識別宿主細胞受體的一種關鍵蛋白），M蛋白（膜糖蛋白），核衣殼蛋白N和小包膜蛋白E。請回答下列問題：
（1）2019-nCoV的檢測可以采用實時熒光RT-PCR（逆轉錄聚合酶鏈式反應）的方法，RT-PCR的具體過程如圖：
①該技術用于對微量2019-nCoV病毒的檢測，可提高檢測的靈敏度，過程Ⅰ需要加入適量緩沖液、模板、原料、
酶和引物A等。
②過程Ⅱ擬對單鏈cDNA進行n次循環(huán)的擴增，理論上需要
個引物B。該過程中
（填“是”或“不是”）必須有解旋酶才能解開雙鏈DNA。
（2）人類在預防與診療傳染性疾病過程中，經常使用疫苗和抗體。目前科技部已經批復支持了5種疫苗的研發(fā)，S蛋白被公認為是冠狀病毒疫苗研發(fā)最具希望的靶點之一。
①理論上用基因工程方法制備2019-nCoV的S蛋白（目的蛋白）時，可先經過一系列途徑獲取大量S基因，構建S基因表達載體時，必須使用
、
兩種工具酶。
②理論上可以采用細胞工程技術制備單克隆抗體，從受體細胞中分離純化出S蛋白，將其作為
注入小鼠體內，從小鼠體內獲取相應的B淋巴細胞，與骨髓瘤細胞融合后，經選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細胞，得到的雜交瘤細胞還需進行克隆化培養(yǎng)和
，經多次篩選，可以得到足夠數量的能分泌所需抗體的細胞，進而獲得抗S蛋白的單克隆抗體。
③理論上也可利用基因編輯技術將基因S導入豬體細胞中，然后通過
技術培育基因編輯豬，可用于生產基因工程疫苗。為獲得更多基因編輯豬，可在胚胎移植前對胚胎進行
處理。
