2019-nCoV（2019新型冠狀病毒）是一類(lèi)具有囊膜的+RNA病毒，基因組編碼多種蛋白質(zhì)，其中有4種主要結(jié)構(gòu)蛋白：S蛋白（刺突糖蛋白，識(shí)別宿主細(xì)胞受體的一種關(guān)鍵蛋白），M蛋白（膜糖蛋白），核衣殼蛋白N和小包膜蛋白E。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）2019-nCoV的檢測(cè)可以采用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）的方法，RT-PCR的具體過(guò)程如圖：

①該技術(shù)用于對(duì)微量2019-nCoV病毒的檢測(cè)，可提高檢測(cè)的靈敏度，過(guò)程Ⅰ需要加入適量緩沖液、模板、原料、

逆（反）轉(zhuǎn)錄

逆（反）轉(zhuǎn)錄

酶和引物A等。
②過(guò)程Ⅱ擬對(duì)單鏈cDNA進(jìn)行n次循環(huán)的擴(kuò)增，理論上需要

2ⁿ-1

2ⁿ-1

個(gè)引物B。該過(guò)程中

不是

不是

（填“是”或“不是”）必須有解旋酶才能解開(kāi)雙鏈DNA。
（2）人類(lèi)在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。目前科技部已經(jīng)批復(fù)支持了5種疫苗的研發(fā)，S蛋白被公認(rèn)為是冠狀病毒疫苗研發(fā)最具希望的靶點(diǎn)之一。
①理論上用基因工程方法制備2019-nCoV的S蛋白（目的蛋白）時(shí)，可先經(jīng)過(guò)一系列途徑獲取大量S基因，構(gòu)建S基因表達(dá)載體時(shí)，必須使用

限制酶（限制性?xún)?nèi)切核酸酶）

限制酶（限制性?xún)?nèi)切核酸酶）

、

DNA 連接酶

DNA 連接酶

兩種工具酶。
②理論上可以采用細(xì)胞工程技術(shù)制備單克隆抗體，從受體細(xì)胞中分離純化出S蛋白，將其作為

抗原

抗原

注入小鼠體內(nèi)，從小鼠體內(nèi)獲取相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞融合后，經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細(xì)胞，得到的雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和

抗體檢測(cè)（專(zhuān)一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性）

抗體檢測(cè)（專(zhuān)一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性）

，經(jīng)多次篩選，可以得到足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞，進(jìn)而獲得抗S蛋白的單克隆抗體。
③理論上也可利用基因編輯技術(shù)將基因S導(dǎo)入豬體細(xì)胞中，然后通過(guò)

核移植

核移植

技術(shù)培育基因編輯豬，可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。為獲得更多基因編輯豬，可在胚胎移植前對(duì)胚胎進(jìn)行

胚胎分割

胚胎分割

處理。