21.2019年底,新冠肺炎在我國(guó)大面積流行。病原體為一種新型RNA冠狀病毒,即2019-nCoV??蒲腥藛T以病毒表面S蛋白作為主要的病毒抗原,擬利用基因工程研制新冠病毒重組蛋白疫苗用于接種預(yù)防。圖1表示病毒S蛋白的基因,圖2表示取自真菌細(xì)胞的質(zhì)粒PcMV及其上部分限制酶切位點(diǎn),圖3表示疫苗制作的簡(jiǎn)要操作流程。
(1)圖3中步驟①所需要的酶和原料是
。步驟②需要的酶是限制酶和
。
(2)圖1中不能選擇EcoRI和AccI兩種限制酶切割S蛋白基因,原因是
?,F(xiàn)在科研人員已經(jīng)可以根據(jù)需要在目的基因兩端添加需要的限制酶切割位點(diǎn)序列,但是一般不在目的基因的兩端添加同一種酶切位點(diǎn),原因是
。若選擇兩種酶且位點(diǎn)序列添加在S蛋白基因的左右兩端(考慮轉(zhuǎn)錄的方向)應(yīng)分別選擇
。
(3)PcMV質(zhì)粒上氨芐青霉素抗性基因的作用是
。
(4)將表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行培養(yǎng)的原因是
。為了檢驗(yàn)表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性,可用S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進(jìn)行
實(shí)驗(yàn),進(jìn)行檢測(cè)。