14.研究發(fā)現(xiàn),肆虐全球的新型冠狀病毒(2019-nCoV)為有包膜病毒,基因組為單股正鏈RNA,長(zhǎng)度為29.8Kb?;谄涮禺愋缘幕蚪M序列,科研工作者研制的新型冠狀病毒核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR熒光探針法)為新型冠狀病毒感染的肺炎疫情防控提供了快速、簡(jiǎn)便、精準(zhǔn)的核酸檢測(cè)方案。RT-PCR熒光探針法即實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(RealTimeQuantitativePCR),通過熒光標(biāo)記的特異性探針,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過程,通過儀器和相應(yīng)的軟件分析結(jié)果,對(duì)待測(cè)樣品通過檢測(cè)熒光信號(hào)的累積(以Ct值表示)來確定樣本中是否有病毒核酸。新型冠狀病毒檢測(cè)的具體操作過程如圖。根據(jù)所學(xué)知識(shí),請(qǐng)回答下列相關(guān)問題:
(1)新型冠狀病毒(2019-nCoV)的相關(guān)蛋白能在宿主細(xì)胞中正常表達(dá)的理論基礎(chǔ)是
。
(2)該反應(yīng)體系中,過程①需要用到
酶,在該體系中使用TaqDNA聚合酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是
。
(3)過程③使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
,其作用是破壞了DNA雙鏈分子中的
,引物A、B的作用是
。
(4)PCR技術(shù)體外擴(kuò)增DNA的原理是
,從酶的角度比較PCR技術(shù)和人體內(nèi)DNA復(fù)制的不同:
。若通過PCR技術(shù)對(duì)某DNA分子擴(kuò)增5代,共需要消耗引物的數(shù)量為
個(gè)。采集新冠肺炎疑似患者的咽部細(xì)胞樣本提取核酸進(jìn)行上述RT-PCR過程,每一個(gè)擴(kuò)增出來的DNA序列,都可與預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號(hào),擴(kuò)增出來的目的基因越多,觀察到的Ct值就越
。
(5)RNA病毒分兩類,一類以自身RNA為模板直接進(jìn)行RNA的復(fù)制;另一類以自身RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成DNA,再以DNA為模板合成RNA,即逆轉(zhuǎn)錄病毒。請(qǐng)利用同位素標(biāo)記法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明新型冠狀病毒是否是逆轉(zhuǎn)錄病毒
。(現(xiàn)有放射性同位素標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸及其他必要試劑,請(qǐng)簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路)