基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心。圖中甲為限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列，圖乙表示目的基因及限制酶切點(diǎn)，圖丙表示目的基因上的DNA片段，圖丁表示質(zhì)粒。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）從供體真核生物的某組織中獲取mRNA，并以此為模板反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生多種片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，該受體菌群體叫

cDNA

cDNA

文庫(kù)，從該文庫(kù)中獲得的目的基因

不含

不含

（填“含”或“不含”）啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子。
（2）若用圖甲所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其專(zhuān)一性而言，切開(kāi)的是G和A所在的兩個(gè)

脫氧核苷酸

脫氧核苷酸

之間的

磷酸二酯

磷酸二酯

鍵，即圖丙的②處。
（3）為了使目的基因和質(zhì)粒定向連接，并且有利于受體細(xì)胞的篩選，提高重組效率，應(yīng)該選擇的限制酶是PstⅠ和

EcoRⅠ

EcoRⅠ

，如果大腸桿菌是受體細(xì)胞，則其體內(nèi)應(yīng)不含

抗四環(huán)素

抗四環(huán)素

基因，以利于篩選出含質(zhì)粒的受體菌。
（4）PCR技術(shù)擴(kuò)增圖乙中的目的基因時(shí)，需要提供模板、Taq酶、

dNTP

dNTP

（原料）、引物C和引物

B

B

等條件。