回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題:
(1)天然農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上存在著一段DNA片段(T-DNA),該片段可轉(zhuǎn)移并整合到植物細(xì)胞染色體上。為便于轉(zhuǎn)基因植物在組織培養(yǎng)階段的篩選,設(shè)計(jì)重組Ti質(zhì)粒時(shí),應(yīng)考慮T-DNA中要有可表達(dá)的目的基因,還需要有可表達(dá)的
抗性基因
抗性基因
。
(2)結(jié)合植物克隆技術(shù)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn),為獲得轉(zhuǎn)基因植株,農(nóng)桿菌侵染的宿主一般要選用具有優(yōu)良性狀、較高的遺傳穩(wěn)定性、
全能性表達(dá)充分
全能性表達(dá)充分
及易被農(nóng)桿菌侵染等特點(diǎn)的植物材料。若植物材料對(duì)農(nóng)桿菌不敏感,則可用
花粉管通道法
花粉管通道法
的轉(zhuǎn)基因方法。
(3)利用帶側(cè)芽的莖段獲得叢狀苗的過(guò)程與利用莖段誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織再獲得叢狀苗的過(guò)程相比,前者總培養(yǎng)時(shí)間
短
短
,且不經(jīng)歷
脫分化
脫分化
過(guò)程,因而其遺傳性狀穩(wěn)定,是大多數(shù)植物快速繁殖的常用方法。
(4)與發(fā)芽培養(yǎng)基相比,配制轉(zhuǎn)基因叢狀苗生根培養(yǎng)基時(shí),可根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)添加
生長(zhǎng)素
生長(zhǎng)素
,促進(jìn)叢狀苗基部細(xì)胞分裂形成愈傷組織并進(jìn)一步分化形成
根的分生組織
根的分生組織
,最終形成根。還可通過(guò)改變MS培養(yǎng)基促進(jìn)生根,如
B
B
( A.提高蔗糖濃度 B.降低培養(yǎng)基濃度 C.提高大量元素濃度 D.不添加瓊脂)。