科學技術是把“雙刃劍”，給我們的生活帶來便利的同時，也帶來了一些隱藏的危機?；卮鹣铝袉栴}：
（1）“外源基因清除”技術能在一定程度上解決外源基因擴散引起的一系列不利影響。該技術是將“外源基因清除”調控組件與基因表達載體的必備組件重組后構建出新的基因表達載體轉入受體細胞中表達，待外源基因完成相應的功能后，“外源基因清除”調控組件將全部外源基因從花粉、種子和果實等特定器官中徹底清除?！巴庠椿蚯宄闭{控組件由“特定器官特異啟動子、重組酶（FLP）基因和融合識別位點（LF）”構成，LF是利用噬菌體的Cre/LoxP系統(tǒng)和酵母的FLP/FRT系統(tǒng)創(chuàng)造出的融合識別位點。FLP基因在適當?shù)臅r間和空間表達后，F(xiàn)LP可識別融合識別位點LF并在L與F之間完成切割，從而將兩個融合識別位點之間的序列在特定時期從特定植物器官的細胞基因組中全部清除。其技術原理如圖1所示：

清除不同器官中的外源基因時需要插入不同的特異啟動子，原因是

特定基因只能在特定器官中表達或基因的表達具有選擇性

特定基因只能在特定器官中表達或基因的表達具有選擇性

。圖示的重組酶發(fā)揮清除作用后剩余的序列組合是

L-F-植物基因組

L-F-植物基因組

（用圖中的各序列名稱和短線表示）。
（2）據(jù)報道，接受豬心臟移植的美國人僅僅存活兩個月時間便死亡。這主要是因為豬體內的GGTA1基因表達引發(fā)人體發(fā)生急性排斥反應造成的。以下是科學家獲得無免疫排斥的克隆豬心臟的過程，正確的操作順序是

⑤④②①③⑥

⑤④②①③⑥

（填序號）。
①早期胚胎培養(yǎng)技術
②動物細胞核移植技術
③胚胎移植技術
④利用基因編輯技術敲除體細胞中GGTA1基因
⑤測定GGTA1基因的堿基序列
⑥手術獲取無免疫排斥的克隆豬心臟
（3）CRISPR/Cas9基因編輯技術可用于豬體內的GGTA1基因敲除。該系統(tǒng)主要包含單鏈向導RNA和Cas9蛋白兩個部分，向導RNA能特異性識別并結合特定的DNA序列，從而引導Cas9蛋白到相應位置并剪切DNA，最終實現(xiàn)對靶基因序列的編輯，具體過程如圖2所示。對豬體內的GGTA1基因進行敲除，首先要根據(jù)合成

GGTA1基因的堿基序列

GGTA1基因的堿基序列

向導RNA。但是更多的學者認為CRISRP/Cas9基因編輯技術有時存在編輯對象出錯而造成“脫靶”的現(xiàn)象，實驗發(fā)現(xiàn)向導RNA的序列長短會影響基因敲除的成功率，向導RNA越短脫靶率越

高

高

。“脫靶”的可能原因是

向導RNA過短，其他DNA序列也含有與向導RNA互補配對的序列，造成向導RNA與非目標基因區(qū)段結合而脫靶

向導RNA過短，其他DNA序列也含有與向導RNA互補配對的序列，造成向導RNA與非目標基因區(qū)段結合而脫靶

。