腫瘤已成為嚴(yán)重危害人類健康的高發(fā)病,主要的治療手段有化療、放療和手術(shù)等,而腫瘤細(xì)胞對(duì)腫瘤藥物產(chǎn)生耐藥性是化療失敗的主要原因之一,研究表明腫瘤細(xì)胞耐藥性的產(chǎn)生與過(guò)量表達(dá)的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白BCRP有關(guān),研究人員嘗試建立穩(wěn)定表達(dá)BCRP的細(xì)胞系?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)研究人員從人的 癌細(xì)胞癌細(xì)胞(填“普通體細(xì)胞”或“癌細(xì)胞”)中提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得大量BCRP基因。
(2)隨后構(gòu)建BCRP基因的真核表達(dá)載體,研究人員選擇了P質(zhì)粒作為載體,因?yàn)槠渚哂校耗鼙徽婧思?xì)胞識(shí)別的啟動(dòng)子,其作用是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn);抗新霉素基因的作用是 便于將含目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)便于將含目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。
(3)通常用兩種酶切割P質(zhì)粒和BCRP基因的原因是 避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接,將表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是 顯微注射法顯微注射法,該過(guò)程的變異類型是 基因重組基因重組。
(4)通過(guò)篩選獲得抗新霉素的受體細(xì)胞,并對(duì)其進(jìn)行多次檢測(cè),最終獲得能高效表達(dá)BCRP的細(xì)胞,在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時(shí)間后分瓶進(jìn)行 傳代傳代(填“原代”或“傳代”)培養(yǎng),最終獲得穩(wěn)定的細(xì)胞系,推測(cè)此細(xì)胞系在后續(xù)研究中的用途有 研究能阻止BCRP過(guò)量表達(dá)的藥物研究能阻止BCRP過(guò)量表達(dá)的藥物(寫出1點(diǎn))。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】癌細(xì)胞;RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn);便于將含目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái);避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接;顯微注射法;基因重組;傳代;研究能阻止BCRP過(guò)量表達(dá)的藥物
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/7/13 8:0:9組卷:1引用:2難度:0.6
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1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>
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發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7 -
3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
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(4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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