科學(xué)家將人的α₁-抗胰蛋白酶（α₁-AT）基因與綿羊乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，成功地培育出能表達(dá)α₁-AT的轉(zhuǎn)基因綿羊，這標(biāo)志著乳腺生物反應(yīng)器的實(shí)用性研究進(jìn)入醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用?；卮鹣铝袉栴}：
（1）從人的胸腺組織細(xì)胞中提取到α₁-AT的mRNA，通過反轉(zhuǎn)錄獲得α₁-AT基因，與人體細(xì)胞內(nèi)基因的結(jié)構(gòu)相比，該方法得到的基因不具有

啟動子、終止子、內(nèi)含子等

啟動子、終止子、內(nèi)含子等

（答兩點(diǎn)）等。為獲得更多的α₁-AT基因，可利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，該技術(shù)需要

2

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種引物，引物的作用是

使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核糖核苷酸

使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核糖核苷酸

。
（2）科學(xué)家將α₁-AT基因與綿羊乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，再與質(zhì)粒構(gòu)建成重組表達(dá)載體，而不是將α₁-AT基因直接導(dǎo)入綿羊受精卵中，原因是

使a-AT基因能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并可遺傳，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用，若直接將其導(dǎo)入受體細(xì)胞，很可能會被降解

使a-AT基因能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并可遺傳，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用，若直接將其導(dǎo)入受體細(xì)胞，很可能會被降解

。表達(dá)載體中啟動子的作用是

（RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位）能驅(qū)動a-AT基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得a-AT

（RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位）能驅(qū)動a-AT基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得a-AT

。
（3）將重組基因表達(dá)載體導(dǎo)入綿羊受精卵中，置于早期胚胎培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)。早期胚胎進(jìn)行移植前，需進(jìn)行性別鑒定，若要在囊胚期鑒定性別，則操作思路是

取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析性別鑒定

取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析性別鑒定

。胚胎移植的實(shí)質(zhì)是

早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移

早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移

。
（4）轉(zhuǎn)基因綿羊成年后需對其體內(nèi)α₁-AT基因表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測，一般采用抗原—抗體雜交法，若出現(xiàn)

雜交帶

雜交帶

，則表明α₁-AT基因成功表達(dá)，轉(zhuǎn)基因綿羊培育成功。