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孔雀石綠(簡(jiǎn)稱MG)是廣泛使用的有機(jī)染料,在自然環(huán)境中極難降解,容易引起土壤污染,進(jìn)而危害人體健康。因此從土壤中分離和篩選出高效的MG降解菌有非常重要的意義。已知MG在水中溶解度低,含過(guò)量MG的固體培養(yǎng)基不透明。
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(1)培養(yǎng)基的配制:MG降解菌富集培養(yǎng)基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等,再加
MG
MG
作為唯一碳源。培養(yǎng)基配制好后,需用
高壓蒸汽滅菌
高壓蒸汽滅菌
法進(jìn)行無(wú)菌處理才能后續(xù)使用。
(2)MG高效降解菌株的富集:如圖所示,將1.0g土樣接入含上述配制好的培養(yǎng)液的三角瓶中,將三角瓶置于30℃、180r/min搖床中振蕩培養(yǎng)1~2天,此操作的目的是
目的菌充分接觸培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
目的菌充分接觸培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
,直至培養(yǎng)液變渾濁后,換瓶重復(fù)操作2-3次,以達(dá)到富集的目的。
(3)MG高效降解菌株的分離和純化:圖中所示的分離純化細(xì)菌的方法是
稀釋涂布平板法
稀釋涂布平板法
。實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)A中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為1.5×109個(gè)/mL,若要在圖中每個(gè)平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液,且每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)約為150個(gè),則應(yīng)將A中的菌液稀釋
106
106
倍。
(4)MG高效降解菌株的鑒定:將純化獲得的菌種接種于含過(guò)量MG的固體培養(yǎng)基(其他營(yíng)養(yǎng)成分等適宜)上,根據(jù)培養(yǎng)基是否出現(xiàn)
透明圈
透明圈
,就可以鑒別出目的菌株,原因是
目的菌株通過(guò)降解MG生長(zhǎng),使菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基變透明,出現(xiàn)透明圈
目的菌株通過(guò)降解MG生長(zhǎng),使菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基變透明,出現(xiàn)透明圈
。
(5)MG高效降解菌株的保存:獲得純凈的菌種后,需要進(jìn)行菌種的保藏。若需長(zhǎng)期保存,可以采用
甘油管藏
甘油管藏
的方法。
【答案】MG;高壓蒸汽滅菌;目的菌充分接觸培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);稀釋涂布平板法;106;透明圈;目的菌株通過(guò)降解MG生長(zhǎng),使菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基變透明,出現(xiàn)透明圈;甘油管藏
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:61引用:6難度:0.7
相似題
  • 1.花生是我國(guó)重要的油料作物和經(jīng)濟(jì)作物?;ㄉ谏L(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,根系不斷分泌2,4-二甲基苯甲酸、蘋(píng)果酸,肉桂酸及香草酸等有機(jī)酸,連年種植花生使有機(jī)酸在土壤中積累,引起花生有機(jī)酸中毒,使產(chǎn)量和品質(zhì)逐年下降。為克服有機(jī)酸中毒對(duì)花生產(chǎn)量的影響,科技工作者通過(guò)“采集帶根土壤→富集培養(yǎng)→純化培養(yǎng)→菌種鑒定”途徑篩選出能降解2,4-二甲基苯甲酸的根際促生菌。如表為5種根際促生菌在兩種不同選擇培養(yǎng)基上的培養(yǎng)結(jié)果。
    選擇培養(yǎng)基(監(jiān)測(cè)指標(biāo))/培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果/根際促生菌種類 2,4-二甲基苯甲酸(檢測(cè)2,4-二甲基苯甲酸剩余量) 不含氮源(觀察菌落數(shù)量及大?。?/td>
    A04 +++ -
    A05 + -
    B07 +++ +++
    B15 ++ +
    B28 + +
    注:表中“+”的數(shù)量越多,表示相對(duì)值越大,“-”表示無(wú)。
    據(jù)表分析回答下列問(wèn)題:
    (1)富集培養(yǎng)和純化培養(yǎng)都使用以2,4-二甲基苯甲酸作唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,其中純化培養(yǎng)時(shí)須使用
     
    (選填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基,理由是
     
    ,接種前該培養(yǎng)基需要采用
     
    滅菌法滅菌。
    (2)綜合考慮2,4-二甲基苯甲酸降解、生產(chǎn)成本投入及產(chǎn)品的產(chǎn)量與品質(zhì)等因素,科技工作者認(rèn)為在花生種植中最適合混合使用的兩種菌種是
     
    ,理由是
     
    。
    (3)請(qǐng)聯(lián)系有機(jī)酸對(duì)土壤環(huán)境和根系生長(zhǎng)的影響,分析連作引起花生產(chǎn)量及品質(zhì)下降的可能原因有
     
    (答出2點(diǎn)即可)。
    發(fā)布:2024/9/13 0:0:8組卷:4引用:2難度:0.6
  • 2.在培養(yǎng)基配制和微生物接種的過(guò)程中,確保無(wú)雜菌污染被稱為無(wú)菌操作。圖中,符合無(wú)菌操作要求的有( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)
    ①火焰燒瓶口并在火焰旁將培養(yǎng)基倒入滅菌培養(yǎng)皿
    ②菌種試管口在火焰上灼燒
    ③接種前灼燒接種環(huán)
    ④接種前培養(yǎng)皿在火焰上灼燒
    ⑤靠近火焰接種
    發(fā)布:2024/9/12 2:0:8組卷:24引用:3難度:0.8
  • 3.某種物質(zhì)A(一種含有C、H、N的有機(jī)物)難以降解,會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染,只有某些細(xì)菌能降解A。研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解A的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基,甲的組分為無(wú)機(jī)鹽、水和A,乙的組分為無(wú)機(jī)鹽、水、A和B、下列表述正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)
    發(fā)布:2024/9/12 6:0:10組卷:10引用:3難度:0.7
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