編碼蛋白甲的DNA序列（序列甲）由A、B、C、D、E五個(gè)片段組成，編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成，如圖1所示．

回答下列問(wèn)題：
（1）現(xiàn)要通過(guò)基因工程的方法獲得蛋白乙，若在啟動(dòng)子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列（TTCGCTTCT…CAGGAAGGA），則所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙，原因是

編碼蛋白乙的DNA序列首端無(wú)ATG，其轉(zhuǎn)錄的mRNA中無(wú)起始密碼子AUG

編碼蛋白乙的DNA序列首端無(wú)ATG，其轉(zhuǎn)錄的mRNA中無(wú)起始密碼子AUG

。
（2）某同學(xué)在用PCR技術(shù)獲取DNA片段B或D的過(guò)程中，在PCR反應(yīng)體系中加入了DNA聚合酶、引物等，還加入了序列甲作為

模板DNA

模板DNA

，加入了

4種脫氧核苷酸

4種脫氧核苷酸

作為合成DNA的原料。
（3）現(xiàn)通過(guò)基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白，要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用，某同學(xué)做了如下實(shí)驗(yàn)：將一定量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組，其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一組作為對(duì)照，培養(yǎng)并定期檢測(cè)T淋巴細(xì)胞濃度，結(jié)果如圖2。
①由圖2可知，當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí)，添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加，此時(shí)若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是

細(xì)胞培養(yǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)

。
②僅根據(jù)圖、圖2可知，上述甲、乙、丙三種蛋白中，若缺少

C

C

（填“A”“B”“C”“D”或“E”）片段所編碼的肽段，則會(huì)降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。
（4）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有

E?coliDNA連接酶

E?coliDNA連接酶

和

T₄DNA連接酶

T₄DNA連接酶

，其中既能連接粘性末端又能連接平末端是

T₄DNA連接酶

T₄DNA連接酶

。