細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、代謝、遺傳等都與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān),而對(duì)蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用,首先需要獲得高純度的蛋白質(zhì)。從紅細(xì)胞中提取和分離血紅蛋白的流程圖如圖,回答下列問題:
(1)血紅蛋白因含有 血紅素血紅素(該物質(zhì)中含F(xiàn)e2+)而呈紅色,這有利于對(duì)提取過程進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
(2)在進(jìn)行樣品處理時(shí)首先要使用 生理鹽水生理鹽水,對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌,目的是 去除雜蛋白(或血漿蛋白),以便于后續(xù)步驟的分離純化去除雜蛋白(或血漿蛋白),以便于后續(xù)步驟的分離純化。在該過程中,若 離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng)離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng),則會(huì)使白細(xì)胞一同沉淀,達(dá)不到分離的效果。
(3)流程圖中步驟A、B分別是 血紅蛋白的釋放和粗分離血紅蛋白的釋放和粗分離。
(4)用凝膠色譜法純化蛋白質(zhì)時(shí),分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì) 先先(“先”或“后”)從層析柱中洗脫出來,裝填凝膠柱時(shí),色譜柱不能有氣泡存在,原因是 氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果。
(5)若要判斷提取分離的血紅蛋白是否達(dá)到要求,需要進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行鑒定,其中的SDS的作用是 SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別,使電泳遷移速率完全取決于分子的大小SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別,使電泳遷移速率完全取決于分子的大小。
【考點(diǎn)】蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能的綜合.
【答案】血紅素;生理鹽水;去除雜蛋白(或血漿蛋白),以便于后續(xù)步驟的分離純化;離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng);血紅蛋白的釋放和粗分離;先;氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果;SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別,使電泳遷移速率完全取決于分子的大小
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:1難度:0.5
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