黃萎病是危害棉花種植的常見疾病，科學(xué)家通過基因工程技術(shù)將抗黃萎病基因--葡萄糖氧化酶基因（GO）導(dǎo)入棉花，獲得抗黃萎病棉花。已知T-DNA上的基因在農(nóng)桿菌中不表達(dá)，在植物細(xì)胞中可以表達(dá)，請將轉(zhuǎn)基因棉花培育步驟補(bǔ)充完整：
（1）構(gòu)建圖片所示重組Ti質(zhì)粒，用

CaCl₂

CaCl₂

處理農(nóng)桿菌，使重組Ti質(zhì)粒進(jìn)入農(nóng)桿菌中，將農(nóng)桿菌接種到含

卡那霉素

卡那霉素

的LB液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)。培養(yǎng)適宜時(shí)間后，離心，去除上清液，加入適量MS液體培養(yǎng)基，可通過測定菌液在600nm波長處的OD值來確定農(nóng)桿菌密度是否適宜。
（2）切取經(jīng)

卡那霉素

卡那霉素

培養(yǎng)的棉花幼苗的下胚軸，直接轉(zhuǎn)入菌液中侵染5-10min后，倒出菌液，用滅菌濾紙吸取下胚軸表面多余菌液，將下胚軸放入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)2天。2天后，向培養(yǎng)基中加入適量

草丁膦

草丁膦

和青霉素，其目的是篩選出轉(zhuǎn)化成功的棉花細(xì)胞和

抑制農(nóng)桿菌生長

抑制農(nóng)桿菌生長

。
（3）將所得愈傷組織接種到適宜培養(yǎng)基中培養(yǎng)，誘導(dǎo)形成胚狀體，在適宜人工條件下繼續(xù)發(fā)育成棉花幼苗。利用

抗原-抗體分子雜交

抗原-抗體分子雜交

技術(shù)檢測棉花細(xì)胞是否合成

葡萄糖氧化酶

葡萄糖氧化酶

，選出抗黃萎病棉花。通過

病原體感染實(shí)驗(yàn)

病原體感染實(shí)驗(yàn)

可以從個(gè)體水平上鑒定該棉花對黃萎病。