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回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達(dá)的問題。
野生型大腸桿菌(E.coli)具有完整的LacZ基因,該基因編碼的β-半乳糖苷酶由α片段和ω片段兩部分組成,兩部分均存在時(shí)可將無(wú)色化合物X-gal“切割”成半乳糖和深藍(lán)色的物質(zhì)5-溴-4-靛藍(lán),從而使整個(gè)菌落變?yōu)樗{(lán)色。DH5α是基因工程中常用的一種大腸桿菌誘變菌株,對(duì)氨芐青霉素敏感,其LacZ基因中編碼ω片段的序列仍然保留,但編碼α片段的序列缺失。
(1)LacZ基因控制β-半乳糖苷酶合成的過程主要包括
轉(zhuǎn)錄
轉(zhuǎn)錄
翻譯
翻譯
兩個(gè)環(huán)節(jié)。
(2)某研究小組構(gòu)建了質(zhì)粒pXY-1,如圖甲所示,該質(zhì)粒含氨芐青霉素抗性基因Ampr和編碼大腸桿菌β-半乳糖苷酶α片段的基因片段LacZ。圖乙顯示的則是NasⅠ、HpaⅡ和KasⅠ三種限制酶的識(shí)別序列(↓表示切割位點(diǎn))。若以該質(zhì)粒作為運(yùn)載體,將外源目的基因(圖丙)導(dǎo)入大腸桿菌DH5α菌株,在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)應(yīng)選用的限制酶是
KasKasⅠ
KasKasⅠ
。此外,還需用到的另一種酶是
DNA連接酶
DNA連接酶
。
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(3)(不定項(xiàng))若用含有氨芐青霉素和X-gal的固體培養(yǎng)基篩選導(dǎo)入了pXY-1質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌,下列說法正確的是
BC
BC

A.沒有導(dǎo)入任何質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)且菌落為白色
B.導(dǎo)入了pXY-1空載體質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)且菌落為藍(lán)色
C.導(dǎo)入了pXY-1重組質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)且菌落為白色
D.導(dǎo)入了pXY-1重組質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)且菌落為藍(lán)色
(4)現(xiàn)從(3)中的固體培養(yǎng)基平板上挑取一個(gè)重組菌落,經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后提取質(zhì)粒,分別用不同的限制酶處理并對(duì)酶切產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,結(jié)果如表所示:
所用限制性內(nèi)切酶 所得條帶長(zhǎng)度
BamHⅠ、ScaⅠ雙酶切 1230bp、2770bp
HpaⅡ、ScaⅠ雙酶切 460bp、1240bp、xbp
據(jù)此可知,目的基因全長(zhǎng)為
900
900
bp,在其內(nèi)部存在
HpaHpaⅡ
HpaHpaⅡ
(填限制酶名稱)的切割位點(diǎn),表中字母x代表的數(shù)值應(yīng)為
2300
2300
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】轉(zhuǎn)錄;翻譯;KasKasⅠ;DNA連接酶;BC;900;HpaHpaⅡ;2300
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/7/9 8:0:8組卷:2引用:1難度:0.6
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  • 1.利用細(xì)菌生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素時(shí),需將人生長(zhǎng)激素基因與pBR322質(zhì)粒結(jié)合,兩者結(jié)構(gòu)如圖。下列敘述正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/10 4:0:2組卷:20引用:2難度:0.6
  • 2.某一質(zhì)粒載體如圖甲所示,Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tett表示四環(huán)素抗性基因。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后,與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化后得到多種大腸桿菌,并利用培養(yǎng)基乙和丙篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/10 9:0:1組卷:59引用:4難度:0.6
  • 3.如圖為轉(zhuǎn)基因抗蟲煙草的培育流程,①②③④表示過程,其中②表示利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞。回答下列相關(guān)問題:
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    (1)在①過程構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),若用同一種限制性核酸內(nèi)切酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段,使兩者形成粘性末端用于拼接,這種方法的明顯缺點(diǎn)是目的基因和質(zhì)粒
     
    (答出2點(diǎn)即可)。另外,影響拼接效率的主要因素,除以上缺點(diǎn)和鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環(huán)境因素外,還有
     
    (答出2點(diǎn)即可)。
    (2)在②過程中,將圖示重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時(shí),可用
     
    處理農(nóng)桿菌,以提高轉(zhuǎn)化效率。操作之后,需要特定的培養(yǎng)基對(duì)農(nóng)桿菌進(jìn)行篩選,其原因是
     
    ,最終篩選到的對(duì)象在相應(yīng)選擇培養(yǎng)基上的存活情況是
     
    。
    在③過程常通過調(diào)節(jié)植物激素的適當(dāng)配比,從愈傷組織誘導(dǎo)出胚狀體,并由此再生出新植株。愈傷組織特點(diǎn)
     
    (寫出兩點(diǎn))。

    發(fā)布:2024/11/9 8:0:6組卷:2引用:1難度:0.7
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