回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達(dá)的問題。
野生型大腸桿菌（E.coli）具有完整的LacZ基因，該基因編碼的β-半乳糖苷酶由α片段和ω片段兩部分組成，兩部分均存在時(shí)可將無色化合物X-gal“切割”成半乳糖和深藍(lán)色的物質(zhì)5-溴-4-靛藍(lán)，從而使整個(gè)菌落變?yōu)樗{(lán)色。DH5α是基因工程中常用的一種大腸桿菌誘變菌株，對氨芐青霉素敏感，其LacZ基因中編碼ω片段的序列仍然保留，但編碼α片段的序列缺失。
（1）LacZ基因控制β-半乳糖苷酶合成的過程主要包括 轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄和 翻譯翻譯兩個(gè)環(huán)節(jié)。
（2）某研究小組構(gòu)建了質(zhì)粒pXY-1，如圖甲所示，該質(zhì)粒含氨芐青霉素抗性基因Ampr和編碼大腸桿菌β-半乳糖苷酶α片段的基因片段LacZ。圖乙顯示的則是NasⅠ、HpaⅡ和KasⅠ三種限制酶的識別序列（↓表示切割位點(diǎn)）。若以該質(zhì)粒作為運(yùn)載體，將外源目的基因（圖丙）導(dǎo)入大腸桿菌DH5α菌株，在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)應(yīng)選用的限制酶是 KasKasⅠKasKasⅠ。此外，還需用到的另一種酶是 DNA連接酶DNA連接酶。
（3）（不定項(xiàng)）若用含有氨芐青霉素和X-gal的固體培養(yǎng)基篩選導(dǎo)入了pXY-1質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌，下列說法正確的是 BCBC。
A.沒有導(dǎo)入任何質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長且菌落為白色
B.導(dǎo)入了pXY-1空載體質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長且菌落為藍(lán)色
C.導(dǎo)入了pXY-1重組質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長且菌落為白色
D.導(dǎo)入了pXY-1重組質(zhì)粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養(yǎng)基上生長且菌落為藍(lán)色
（4）現(xiàn)從（3）中的固體培養(yǎng)基平板上挑取一個(gè)重組菌落，經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后提取質(zhì)粒，分別用不同的限制酶處理并對酶切產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果如表所示：
| 所用限制性內(nèi)切酶 | 所得條帶長度 |
| BamHⅠ、ScaⅠ雙酶切 | 1230bp、2770bp |
| HpaⅡ、ScaⅠ雙酶切 | 460bp、1240bp、xbp |
900
900
bp,在其內(nèi)部存在 HpaHpaⅡ
HpaHpaⅡ
（填限制酶名稱）的切割位點(diǎn)，表中字母x代表的數(shù)值應(yīng)為 2300
2300
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】轉(zhuǎn)錄；翻譯；KasKasⅠ；DNA連接酶；BC；900；HpaHpaⅡ；2300
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/7/9 8:0:8組卷：2引用：1難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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