近年來,化肥對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的負(fù)面影響及對(duì)環(huán)境的污染日益引起人們的關(guān)注。由于固氮菌能固定大氣中的氮?dú)?,提高土壤的氮含量,因而分離得到自生固氮菌(不與植物形成共生體)用以對(duì)土壤進(jìn)行接種已成為一個(gè)新的研究方向。如表是微生物培養(yǎng)時(shí)常用的兩種培養(yǎng)基,回答下列問題:
培養(yǎng)基甲 |
馬鈴薯 |
葡萄糖 |
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瓊脂 |
蒸餾水 |
pH |
200g |
20g |
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15~20g |
1000mL |
自然 |
培養(yǎng)基乙 |
甘露醇(或蔗糖、葡萄糖) |
KH2PO4 |
MgSO4?7H2O |
NaCl |
CaSO4?2H2O |
CaCO3 |
瓊脂 |
水 |
pH |
10g |
0.2g |
0.2g |
0.2g |
0.1g |
5g |
20g |
1000mL |
自然 |
(1)分離固氮菌選用
乙
乙
(填“甲”或“乙”)培養(yǎng)基。從土壤深度看,選填
表層
表層
(“表層”或“深層”)的土壤容易得到自生固氮菌的菌種,獲得的土樣用
無菌水
無菌水
溶解后備用。
(2)接種前,將滅過菌的培養(yǎng)基放在37℃的恒溫箱中培養(yǎng)24h,目的是
檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否合格
檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否合格
。
(3)用接種環(huán)蘸取少許稀泥漿,在培養(yǎng)基表面輕點(diǎn)15-20處,此操作過程中需對(duì)接種環(huán)進(jìn)行
兩
兩
次灼燒滅菌。接好種的培養(yǎng)皿要在
皿底
皿底
處寫明實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、接種人和日期。培養(yǎng)34天后可在接種的稀泥漿周圍看到黏膜液狀培養(yǎng)物,這是含有自生固氮菌的標(biāo)志。
(4)某特定染液能使自生固氮菌著色,挑取黏液,用該染液染色后制成涂片,制成的涂片在
高倍
高倍
(填
“低倍”或“高倍”)顯微鏡下觀察固氮菌的形態(tài)特征。篩選到的菌落需進(jìn)一步分離純化,純化自生固氮菌的培養(yǎng)接種方法最常用的兩種是
稀釋涂布平板法、平板劃線法
稀釋涂布平板法、平板劃線法
。