鋁在土壤中常以鋁酸鹽的形式存在，可造成土壤酸化而影響植物生長(zhǎng)。鋁能抑制植物根尖細(xì)胞的分裂，破壞根組織。某植物甲的根毛細(xì)胞的細(xì)胞膜上存在蘋果酸通道蛋白（ALMT），該通道蛋白能將蘋果酸轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞外來緩解鋁毒?？蓪⒖刂艫LMT的基因?qū)氩荒弯X的植物中，最終獲得耐鋁植物。請(qǐng)回答下列問題：
（1）如表是運(yùn)載體上出現(xiàn)的幾種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)。用表中的限制酶切割 DNA后能形成相同黏性末端的是

XhoI與SalI

XhoI與SalI

。（識(shí)別序列中的1表示酶切位點(diǎn)）

限制酶	識(shí)別序列和切割位點(diǎn)
EcoRⅠ	G↓AATTC
BamHⅠ	G↓GATCC
HindⅢ	A↓AGCTT
XhoⅠ	C↓TCGAG
NdeⅠ	CA↓TATG
SalⅠ	G↓TCGAC

（2）欲獲得ALMT基因的cDNA，科研人員從

植物甲的根（根毛）細(xì)胞

植物甲的根（根毛）細(xì)胞

細(xì)胞中獲取總mRNA，在相應(yīng)酶作用下獲得多種cDNA，再利用ALMT基因制作出特異性

引物

引物

，通過PCR方法得到ALMT基因的cDNA。
（3）啟動(dòng)子是

RNA聚合酶

RNA聚合酶

識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，能調(diào)控目的基因的表達(dá)。ALMT基因的啟動(dòng)子有兩種類型，其中α啟動(dòng)子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導(dǎo)下表達(dá)，β啟動(dòng)子能使ALMT基因高效表達(dá)而無需酸性誘導(dǎo)。在獲得轉(zhuǎn)ALMT基因耐鋁植物時(shí)應(yīng)使用

α

α

啟動(dòng)子，不使用另外一種啟動(dòng)子的原因是

β啟動(dòng)子可使植物根細(xì)胞持續(xù)轉(zhuǎn)運(yùn)有機(jī)酸

β啟動(dòng)子可使植物根細(xì)胞持續(xù)轉(zhuǎn)運(yùn)有機(jī)酸

，導(dǎo)致正常土壤酸化，并影響植物生長(zhǎng)。
（4）科研人員采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，首先將ALM基因?qū)胫参锛?xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，再通過

植物組織培養(yǎng)

植物組織培養(yǎng)

技術(shù)成功獲得了耐鋁植株。
（5）若將一株耐鋁植株與普通植株雜交，得到的后代中耐鋁植株：普通植株約為3：1，則可判斷這株耐鋁植株細(xì)胞至少轉(zhuǎn)入了

2

2

個(gè)ALMT基因，轉(zhuǎn)入的基因在染色體上的位置關(guān)系是：

分別位于兩條非同源染色體上

分別位于兩條非同源染色體上

；若使這株耐鋁植株自交，后代中耐鋁植株：普通植株約為

15：1

15：1

。