孔雀石綠（簡稱MG）是廣泛使用的有機(jī)染料，在自然環(huán)境中極難降解，容易引起土壤污染，進(jìn)而危害人體健康。因此從土壤中分離和篩選出高效的MG降解菌有非常重要的意義。已知MG在水中溶解度低，含過量MG的固體培養(yǎng)基不透明。

（1）培養(yǎng)基的配制：MG降解菌富集培養(yǎng)基需含有NaH₂PO₄、KH₂PO₄、NaCl、NH₄Cl、CaCl₂、MgSO₄、水等，再加 作為唯一碳源。配制好的培養(yǎng)基，需用 法進(jìn)行滅菌。
（2）MG高效降解菌株的分離和純化：圖中所示的分離純化細(xì)菌的方法是 ，用該方法統(tǒng)計(jì)樣品的菌落數(shù)目比活菌的實(shí)際數(shù)目 （“少”或“多”），原因是 。實(shí)驗(yàn)室采用此方法，將1mL樣品稀釋1000倍，在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)正確操作培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為150、158和160．據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)至少為 個(gè)。
（3）黑曲霉是一種絲狀真菌，黑曲霉的PDA液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基組成為：麩皮、豆粉餅、（NH₄）₂SO₄、MgSO₄?7H₂O、KH₂PO₄，培養(yǎng)時(shí)需要通氣振蕩。豆粉餅可提供黑曲霉生長所需的 ；若要分離黑曲霉菌落，上述培養(yǎng)基中還需要添加 ，在培養(yǎng)基滅菌前需將pH調(diào)至 （填“酸性”“中性”或“堿性”）。
（4）計(jì)數(shù)黑曲霉菌液孢子濃度的方法為：用多層紗布過濾黑曲霉培養(yǎng)液得到孢子懸浮液，取1mL懸浮液用無菌水逐級(jí)稀釋10⁴倍，再取稀釋液滴加至血細(xì)胞計(jì)數(shù)板（規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm,由400個(gè)小格組成）進(jìn)行計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)得到計(jì)數(shù)的小格中平均孢子數(shù)2個(gè)，則黑曲霉培養(yǎng)液中孢子濃度為為 個(gè)mL^-1。
（5）以大豆為主要原料，利用黑曲霉產(chǎn)生的蛋白酶可將原料中的蛋白質(zhì)水解成 ，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制可得到醬油。

【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．

【答案】孔雀石綠（MG）；高壓蒸汽滅菌；稀釋涂布平板法；少；當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落；1.56×10⁹；碳源和氮源；瓊脂；酸性；8×10¹⁰；小分子肽和氨基酸