鹽害是影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的非生物脅迫因子之一,植物在高鹽脅迫下會(huì)產(chǎn)生大量H2O2和MDA(膜脂過氧化物)。LEA蛋白在植物遭受重大非生物脅迫時(shí)(如:鹽害)起到很大的保護(hù)作用,科研人員將耐鹽酵母LEA蛋白基因NLEAs導(dǎo)入大豆培育轉(zhuǎn)耐鹽基因大豆植株。回答下列問題:
(1)為獲取NLEAS基因,可從酵母中提取總RNA,經(jīng) 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程得到cDNA,再經(jīng)PCR技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增。
(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體過程需要用到的有關(guān)酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶,若用同種酶切割載體后得到的一個(gè)末端序列為,則與該載體末端連接的NLEAS基因末端序列是 。構(gòu)建的基因表達(dá)載體中具有終止子,終止子是指 位于基因尾端,使轉(zhuǎn)錄終止的特殊DNA片段位于基因尾端,使轉(zhuǎn)錄終止的特殊DNA片段。
(3)將NLEAs基因?qū)氪蠖辜?xì)胞,常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,農(nóng)桿菌的作用是 使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞,并將目的基因整合到受體細(xì)胞染色體DNA上使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞,并將目的基因整合到受體細(xì)胞染色體DNA上。
(4)科研人員從轉(zhuǎn)耐鹽NLEAs基因大豆根部提取到了大量LEA蛋白,但還是無法說明該基因工程操作是否成功,還需要從個(gè)體水平上設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)合題干信息,寫出實(shí)驗(yàn)思路,預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)思路:將長勢一致的野生型大豆和轉(zhuǎn)基因大豆幼苗種植在高鹽土壤中,一段時(shí)間后測定并比較兩種植株產(chǎn)生的H2O2和MDA含量
預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果:轉(zhuǎn)基因大豆比野生型大豆產(chǎn)生的H2O2和MDA含量更少實(shí)驗(yàn)思路:將長勢一致的野生型大豆和轉(zhuǎn)基因大豆幼苗種植在高鹽土壤中,一段時(shí)間后測定并比較兩種植株產(chǎn)生的H2O2和MDA含量
預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果:轉(zhuǎn)基因大豆比野生型大豆產(chǎn)生的H2O2和MDA含量更少。
預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果:轉(zhuǎn)基因大豆比野生型大豆產(chǎn)生的H2O2和MDA含量更少
預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果:轉(zhuǎn)基因大豆比野生型大豆產(chǎn)生的H2O2和MDA含量更少
【考點(diǎn)】目的基因的篩選與獲取.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄;限制酶和DNA連接酶;;位于基因尾端,使轉(zhuǎn)錄終止的特殊DNA片段;使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞,并將目的基因整合到受體細(xì)胞染色體DNA上;實(shí)驗(yàn)思路:將長勢一致的野生型大豆和轉(zhuǎn)基因大豆幼苗種植在高鹽土壤中,一段時(shí)間后測定并比較兩種植株產(chǎn)生的H2O2和MDA含量
預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果:轉(zhuǎn)基因大豆比野生型大豆產(chǎn)生的H2O2和MDA含量更少
預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果:轉(zhuǎn)基因大豆比野生型大豆產(chǎn)生的H2O2和MDA含量更少
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:25引用:2難度:0.7
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1.通過設(shè)計(jì)引物,運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程,其中引物1序列中含有一個(gè)堿基T不能與目的基因片段配對(duì),但不影響引物與模板鏈的整體配對(duì),反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識(shí)別位點(diǎn)。有關(guān)敘述正確的是( )
發(fā)布:2024/11/19 10:30:1組卷:114引用:5難度:0.7 -
2.雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的DNA子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)通過PCR技術(shù)獲得被標(biāo)記且以堿基“T”為末端的、不同長度的DNA子鏈片段。在反應(yīng)管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、相關(guān)的酶和相應(yīng)的緩沖液等,還需加入的原料是( ?。?br />
①dCTP,dGTP,dATP
②dGTP,dATP,dTTP,dCTP
③α位被32P標(biāo)記的ddTTP
④γ位被32P標(biāo)記的ddTTP發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:26引用:1難度:0.6 -
3.目前研究混雜DNA群體中的特異DNA序列,一般基于兩種不同的方法,即DNA克隆和DNA分子雜交,如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/11/22 4:0:1組卷:21引用:2難度:0.6
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