Rag₂基因缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細胞（ES細胞）對Rag₂基因缺失的小鼠進行基因治療。其技術(shù)流程如圖：

請回答下列問題：
（1）步驟①中，在核移植前應(yīng)將卵母細胞在體外培養(yǎng)到

減數(shù)第二次分裂中期（或MII期）

減數(shù)第二次分裂中期（或MII期）

（填具體時期）。步驟②中。重組胚胎培養(yǎng)時需要添加CO₂，CO₂的主要作用是

維持培養(yǎng)液的pH

維持培養(yǎng)液的pH

。
（2）ES細胞在形態(tài)上表現(xiàn)為

體積小、細胞核大、核仁明顯

體積小、細胞核大、核仁明顯

，在功能上

具有發(fā)育的全能性

具有發(fā)育的全能性

。體外誘導(dǎo)ES細胞分化時，通常需要添加

分化誘導(dǎo)因子（或?；撬帷⒍□－h(huán)腺苷酸）

分化誘導(dǎo)因子（或?；撬帷⒍□－h(huán)腺苷酸）

。
（3）步驟③中，如獲取的Rag₂基因數(shù)量較少，需利用PCR技術(shù)擴增，當(dāng)Taq酶從引物起始進行互補鏈的合成時，需加熱至

70～75

70～75

℃。
（4）為檢測Rag₂基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可利用

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

技術(shù)檢測。治療成功后，淋巴細胞會在

骨髓、胸腺

骨髓、胸腺

中成熟。