34.天然玫瑰因缺少控制合成藍(lán)色色素的基因B而不能開藍(lán)色花。科學(xué)家從開藍(lán)色花的矮牽牛中了基因B后,利用生物工程技術(shù)培育出了開藍(lán)色花的玫瑰。如圖為該育種過程的操作流程。
注:Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因。外源DNA插入到Ampr或Tetr中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活。限制酶EcoRⅠ、HindⅢ和BamHⅠ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)均不相同。請(qǐng)回答下列問題:
(1)圖中將基因B導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞的方法稱為
。選擇Ti質(zhì)粒作為運(yùn)載體的原因是Ti質(zhì)粒上的
可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。
(2)在構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時(shí),應(yīng)選用圖中的
(限制酶)。有人用該種限制酶分別切割Ti質(zhì)粒和基因B后混合,加入DNA連接酶進(jìn)行反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化細(xì)菌甲。結(jié)果得到了四種細(xì)菌甲:未被轉(zhuǎn)化的、含基因B的、含Ti質(zhì)粒的和含重組Ti質(zhì)粒的。篩選目的細(xì)菌甲時(shí),先用含
的固體培養(yǎng)基培養(yǎng),不能生長(zhǎng)的是未被轉(zhuǎn)化的和含環(huán)狀基因B的細(xì)菌甲;然后再將能生長(zhǎng)的細(xì)菌甲接種到含
的固體培養(yǎng)基中,目的細(xì)菌甲在此培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng)。