33.p53基因是人體內一種抑癌基因.該基因編碼的p53蛋白可對癌變前的DNA損傷進行修復,使其恢復正常,或誘導其進入休眠狀態(tài)或細胞凋亡,阻止細胞癌變.“今又生”是我國首創(chuàng)的基因治療藥物之一,是世界首個獲準上市的基因治療藥物,其核心成分是利用腺病毒和人p53基因拼裝得到的重組病毒.“今又生”藥物中的腺病毒經基因工程改造后,在宿主細胞內不能復制,不能整合到染色體上.請回答下列問題:
(1)將p53基因與腺病毒拼裝成重組病毒,需要用到的工具酶有
.常用的基因工程載體除動植物病毒外,還有
.
(2)限制酶能將特定序列的核苷酸之間的
鍵切開,形成
末端.
(3)在“今義生”的生產中,科學家選擇性地放棄了一般載體都應該具有的
,以獲得更高的安全性能.p53基因應插入載體的
之間,以便于基因的表達.
(4)p53基因的大量擴增可以采用PCR技術,該技術中需使用的一種特殊的酶是
.如圖是需要擴增的p53基因在DNA中的位置示意圖,擴增過程需要
種引物.n次循環(huán)之后,只含目的基因的片段占所有擴增產物的比例為
.