25.某動物體內(nèi)含有某目的基因,研究者欲將該基因?qū)氪竽c桿菌的質(zhì)粒中保存,該質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因(AmpR)、LacZ基因及一些酶切位點,其結(jié)構(gòu)和簡單的操作步驟如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)保存基因技術(shù)的成熟使構(gòu)建某種生物的基因文庫成為可能,重組DNA技術(shù)是保存生物基因的關(guān)鍵技術(shù)。據(jù)圖總結(jié)在受體菌中保存基因的基本步驟:
(用→將各步驟連接)。
(2)在第③步中,為了使質(zhì)粒DNA能與目的基因連接,需要在混合物中加入
酶。若第②步用同一種限制酶處理質(zhì)粒和目的基因,僅考慮1個目的基因和1個質(zhì)粒,則在第③步的混合物中,會形成
種含目的基因的重組產(chǎn)物。進(jìn)行第④步之前一般用Ca
2+對大腸桿菌進(jìn)行處理,目的是
。
(3)在僅添加了氨芐青霉素的培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞不一定是目的細(xì)胞,請說明理由:
。請對篩選目的細(xì)胞的操作提出完善意見:
。