21.將微生物接種在只缺少某種營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,再將所缺的營養(yǎng)物質(zhì)點(diǎn)植于平板上,該營養(yǎng)物質(zhì)便逐漸擴(kuò)散于植點(diǎn)周圍。該微生物若需要此種營養(yǎng)物質(zhì),便在這種營養(yǎng)物質(zhì)擴(kuò)散處生長繁殖,形成肉眼可見的菌落圈,這種測定微生物營養(yǎng)需求的方法稱為生長譜法。某興趣小組嘗試用生長譜法測定某種大腸桿菌對糖類(碳源)的需求情況,操作流程如下:
Ⅰ.培養(yǎng)基的制備。該小組所用無碳培養(yǎng)基配方如表(加水定容至1L):
成分 |
NaCl |
KH2PO4 |
K2HPO4 |
(HN4)2SO4 |
MgSO4?7H2O |
瓊脂 |
質(zhì)量/g |
1 |
0.5 |
0.5 |
2 |
0.2 |
20 |
同時配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖溶液各50mL
Ⅱ.將大腸桿菌懸液與溶化并冷卻至50℃的固體培養(yǎng)基混勻,倒平板。
Ⅲ.將已凝固的平板背面用記號筆劃分為四個區(qū),并注明要點(diǎn)植的糖類名稱。
V.通過無菌操作分別加入蘸有不同糖類的無菌濾紙片,待平板吸收干燥后倒置培養(yǎng)24小時。
結(jié)合所學(xué)知識,回答下列問題:
(1)無碳培養(yǎng)基配方中加入(NH
4)
2SO
4的目的是
。對培養(yǎng)基及糖溶液通常采用的滅菌方法是
。倒平板后用
法進(jìn)行接種。
(2)該小組發(fā)現(xiàn)最終在培養(yǎng)基的四個區(qū)內(nèi)均有菌落圈產(chǎn)生,但大小不同,據(jù)此得到的初步結(jié)論是
。
(3)生長譜法還可用于某些營養(yǎng)缺陷型菌株(失去合成某種生長因子能力的菌株)的篩選和鑒定,例如大腸桿菌經(jīng)紫外線誘變處理后會產(chǎn)生一些營養(yǎng)缺陷型突變個體,現(xiàn)已純化并制備出某營養(yǎng)缺陷型的菌懸液,但不清楚是氨基酸缺陷型、維生素缺陷型還是氨基酸-維生素缺陷型,請簡要寫出用生長譜法進(jìn)行鑒定的思路,并預(yù)期可能的結(jié)果及結(jié)論
。