23.科學(xué)家運(yùn)用同位素標(biāo)記、密度梯度離心等方法研究DNA復(fù)制的機(jī)制。請(qǐng)回答問(wèn)題:
(1)研究者用蠶豆根尖進(jìn)行實(shí)驗(yàn),主要步驟如下:
步驟A |
將蠶豆根尖置于含放射性3H標(biāo)記胸腺嘧啶的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)大約一個(gè)細(xì)胞周期的時(shí)間。 |
在第一個(gè)、第二個(gè)和第三個(gè)細(xì)胞周期取樣,檢測(cè)中期細(xì)胞染色體上的放射性分布。 |
步驟B |
取出根尖,洗凈后轉(zhuǎn)移至不含放射性物質(zhì)的培養(yǎng)液中,繼續(xù)培養(yǎng)大約兩個(gè)細(xì)胞周期的時(shí)間 |
①步驟A目的是標(biāo)記細(xì)胞中的
分子。若依據(jù)“DNA半保留復(fù)制”假說(shuō)推測(cè),DNA分子復(fù)制的產(chǎn)物應(yīng)符合甲圖中的
(選甲圖中字母填寫(xiě))。
②若第二個(gè)細(xì)胞周期的放射性檢測(cè)結(jié)果符合乙圖中的
(選乙圖中字母填寫(xiě)),且第三個(gè)細(xì)胞周期的放射性檢測(cè)結(jié)果符合乙圖中的
(選乙圖中字母填寫(xiě)),則假說(shuō)成立。
(2)研究者為進(jìn)一步確定“DNA半保留復(fù)制”的假說(shuō),將兩組大腸桿菌分別在
15NH
4Cl培養(yǎng)液和
14NH
4Cl培養(yǎng)液中繁殖多代,培養(yǎng)液中的氮可被大腸桿菌用于合成
分子,作為DNA復(fù)制的原料,最終得到含
15N的大腸桿菌和含
14N的大腸桿菌。
(3)實(shí)驗(yàn)一:從含
15N的大腸桿菌和含
14N的大腸桿菌中分別提取親代DNA,混合后放在100℃條件下進(jìn)行熱變性處理,然后進(jìn)行密度梯度離心,再測(cè)定離心管中混合的DNA單鏈含量,結(jié)果如圖a所示。熱變性處理導(dǎo)致DNA分子中堿基對(duì)之間的
發(fā)生斷裂,形成兩條DNA單鏈,因此圖a中出現(xiàn)兩個(gè)峰。
(4)實(shí)驗(yàn)二:研究人員將含
15N的大腸桿菌轉(zhuǎn)移到
14NH
4Cl培養(yǎng)液中,繁殖一代后提取子代大腸桿菌的DNA(F
1DNA),將F
1DNA熱變性處理后進(jìn)行密度梯度離心,離心管中出現(xiàn)的兩個(gè)條帶對(duì)應(yīng)圖b中的兩個(gè)峰。若將未進(jìn)行熱變性處理的F
1DNA進(jìn)行密度梯度離心,則離心管中只出現(xiàn)一個(gè)條帶。據(jù)此分析,F(xiàn)
1DNA是由
(選填①~④中的序號(hào))組成,作出此判斷的依據(jù)是
(選填⑤~⑦中的序號(hào),多選)。
①兩條
15N-DNA單鏈
②兩條
14N-DNA單鏈
③兩條既含
15N又含有
14N的DNA單鏈
④一條
15N-DNA單鏈、一條
14N-DNA單鏈
⑤雙鏈的F
1DNA密度梯度離心結(jié)果只有一個(gè)條帶,排除“全保留復(fù)制”
⑥單鏈的F
1DNA密度梯度離心結(jié)果有兩個(gè)條帶,排除“彌散復(fù)制”
⑦圖b與圖a中兩個(gè)峰的位置相同,支持“半保留復(fù)制”
(5)半不連續(xù)復(fù)制是1966年日本科學(xué)家岡崎提出的。為驗(yàn)證假說(shuō),他進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):讓T
4噬菌體在20℃時(shí)侵染大腸桿菌70min后,將同位素
3H標(biāo)記的脫氧核苷酸添加到大腸桿菌的培養(yǎng)基中,在2秒、7秒、15秒、30秒、60秒、120秒后,分離T
4噬菌體DNA并通過(guò)加熱使DNA分子全部變性后,再進(jìn)行密度梯度離心,以DNA單鏈片段分布位置確定片段大?。ǚ肿釉叫‰x試管口距離越近),并檢測(cè)相應(yīng)位置DNA單鏈片段的放射性,結(jié)果圖3所示。
①研究表明,富含G-C堿基對(duì)的DNA分子加熱變性時(shí)需要的溫度較高,推測(cè)其原因是
。
②圖中,與60秒結(jié)果相比,120秒結(jié)果中短鏈片段的量
,原因是
。