30.科學家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達。但在進行基因工程的操作過程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是一G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-,請據(jù)圖回答:
(1)過程①所需要的酶是
。-般采用PCR技術擴增目的基因,前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列,原因是
。
(2)在構建基因表達載體的過程中,用
切割質(zhì)粒,獲取目的基因時只年用一種限制酶,應用
切割目的基因所在的外源DNA.用限制酶切割目的基由和載體后形成的黏性末端在DNA連接酶的催化作用中通過
原則進行連接。人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進行重組,原因是
。
(3)在過程③中一般將受體大腸桿菌用CaCl
2溶液(Ca
2+)進行處理,使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),這種細胞稱為
。