45.病菌感染首蓓,對首蓓的產(chǎn)量和品質(zhì)有很多的影響,研究人員將溶菌酶基因(LYZ基因)和綠色熒光蛋白基因(GFP基因)連接為LYZ一GFP基因,利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入到苜蓿中。本實(shí)驗(yàn)中使用圖1所示質(zhì)粒構(gòu)建載體,Vir區(qū)的基因產(chǎn)物是T一DNA整合到植物基因組中的必備條件,圖2表示含有LYZ一GFP基因的DNA片段。圖中箭頭表示相應(yīng)限制酶的酶切位點(diǎn),酶級形成的末端均為私性末端,據(jù)圖回答問題:
(1)用PCR法對圖2所示基因片段進(jìn)行擴(kuò)增,并將產(chǎn)物用限制酶Ⅰ進(jìn)行切割,質(zhì)粒用同樣的限制酶切割,用DNA連接酶進(jìn)行連接。只考慮兩段不同DNA片段相連(不考慮自身的連接)的情況所得到的環(huán)狀DNA分子有
種。
(2)本實(shí)驗(yàn)中的目的基因是
,最佳的限制酶的選擇是
。在鑒別首蓓細(xì)胞中是否含有目的基因的時(shí)候,研究者可選擇的標(biāo)記基因有
。
(3)目的基因在體外擴(kuò)增時(shí),與體內(nèi)復(fù)制的區(qū)別在于
。
(4)目的基因的表達(dá)產(chǎn)物在植物體中發(fā)揮作用時(shí)
(填“具有”或“不具有”)特異性。