35．現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定致畸、致癌作用的化學(xué)物質(zhì)，利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法能夠鑒定它們是否有毒性，并比較二者毒性的強(qiáng)弱：請(qǐng)完成下列實(shí)驗(yàn)報(bào)告．
I．實(shí)驗(yàn)材料：小白鼠胚胎．
Ⅱ．藥品用具：胰蛋白酶液、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、動(dòng)物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、細(xì)胞培養(yǎng)箱、載玻片、蓋玻片、光學(xué)顯微鏡、小白鼠正常體細(xì)胞有絲分裂高倍顯微鏡照片．
Ⅲ．實(shí)驗(yàn)原理：
，根據(jù)這些變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)（以下稱Q值），可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性．
Ⅳ．實(shí)驗(yàn)步驟：
（1）制備細(xì)胞懸液：把小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，再加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸液．
（2）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)：
①取A、B、C三個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶，
．
②
．
③
．
（3）制作臨時(shí)裝片：
①當(dāng)細(xì)胞繁殖到大約第8代左右時(shí)，同時(shí)從細(xì)胞培養(yǎng)箱中取出三個(gè)培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，使培養(yǎng)的細(xì)胞從瓶壁上脫落，再加入動(dòng)物細(xì)胞固定液迅速殺死細(xì)胞，將細(xì)胞固定在不同的分裂時(shí)期．
②靜置一段時(shí)間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸液．滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號(hào)的載玻片中央，加1-2滴一定濃度的
染色，3-5min后，蓋上蓋玻片，制成臨時(shí)裝片．
（4）鏡檢和統(tǒng)計(jì)：把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，尋找處于有絲分裂中期的細(xì)胞，并與
對(duì)比以確認(rèn)發(fā)生上述變異的細(xì)胞，同時(shí)統(tǒng)計(jì)該期變異的細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)（Q值）．
V．實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
| 培養(yǎng)瓶 |
A |
B |
C |
| Q值 |
1.3% |
12.5% |
0.1% |
Ⅵ．實(shí)驗(yàn)結(jié)論：
．
