17.Graves病(GD)可導致甲狀腺功能亢進。研究發(fā)現(xiàn),GD患者甲狀腺細胞表面表達大量細胞間粘附分子1 (ICAM-1),導致甲狀腺腫大??蒲腥藛T通過制備單克隆抗體,對治療GD進行了嘗試。
(1)用ICAM-1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠,幾周后取這些免疫小鼠的血清,分別加入多孔培養(yǎng)板的不同孔中,多孔培養(yǎng)板中需加入
以檢測這些小鼠產生的抗體。依據(jù)反應結果,選出抗原-抗體反應最
( 強/弱)的培養(yǎng)孔所對應的小鼠M。
(2)取小鼠M的脾臟細胞制備成細胞懸液,與實驗用骨髓瘤細胞進行融合,用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有
能力的細胞。
核苷酸合成有兩個途徑,物質A可以阻斷其中的全合成途徑(如圖)。正常細胞內含有補救合成途徑所必需的轉化酶和激酶,制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞中缺乏轉化酶。可用加入H、A、T三種物質的“HAT培養(yǎng)基”篩選特定的雜交瘤細胞。
融合前將部分培養(yǎng)細胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng),一段時間后培養(yǎng)基中
(有/無)骨髓瘤細胞生長,說明培養(yǎng)基符合實驗要求。雜交瘤細胞可以在HAT培養(yǎng)基上大量繁殖的原因是
。
(3)將獲得的上述細胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng),用ICAM-1檢測,從中選擇
的雜交瘤細胞,植入小鼠腹腔中克隆培養(yǎng),一段時間后從小鼠腹水中提取實驗用抗體。
(4)若進一步比較實驗用抗體和
131I對GD模型小鼠的治療作用,可將若干GD模型小鼠等分為三組,請補充表中的實驗設計。
對照組(A) |
131I治療組(B) |
單克隆抗體治療組(C) |
給GD模型小鼠腹腔注射0.1mL無菌生理鹽水 |
給GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL無菌生理鹽水的131I |
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