研究發(fā)現(xiàn)GTSE1基因在原發(fā)性肝癌細胞中表達量的明顯升高會導致其對化療藥物5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性下降。為了驗證上述結(jié)論,某同學進行了如下實驗:實驗材料:肝癌細胞株Hep-G2,培養(yǎng)液,siRNA(可與GTSE1的mRNA形成雙鏈),5氟尿嘧啶(5-FU)溶液,卡式瓶,比濁計,生理鹽水等。
(說明:實驗條件適宜;每隔24h測定一次,連續(xù)培養(yǎng)48h;siRNA轉(zhuǎn)入和相關物質(zhì)含量測定具體方法不作要求)
實驗思路:
①取卡式瓶若干,
平均分為三組,編號甲乙丙,分別加入等量的肝癌細胞株Hep-G2和培養(yǎng)液,同時測定各組中渾濁度和GTSE1蛋白含量
平均分為三組,編號甲乙丙,分別加入等量的肝癌細胞株Hep-G2和培養(yǎng)液,同時測定各組中渾濁度和GTSE1蛋白含量
。
②分組處理如下:甲組加入適量生理鹽水,
乙組加入等量的5-FU溶液,丙組用siRNA轉(zhuǎn)染后再加入等量的5-FU溶液
乙組加入等量的5-FU溶液,丙組用siRNA轉(zhuǎn)染后再加入等量的5-FU溶液
。
③將各組材料置于CO
2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h,測定各組渾濁度和GTSE1蛋白含量。
④統(tǒng)計并分析實驗數(shù)據(jù)。請回答:
(1)完善實驗思路。
(2)預測實驗結(jié)果
(以柱形圖的形式呈現(xiàn),初始值直接標注于坐標軸上)
(3)分析與討論:
①5-FU作為常用的抗癌藥物,可直接作為
RNA合成(或轉(zhuǎn)錄)
RNA合成(或轉(zhuǎn)錄)
的原料,也可轉(zhuǎn)變?yōu)榉蜞奏っ撗鹾塑账?,進而影響
DNA復制
DNA復制
。
②siRNA抑制肝癌細胞增殖的機理可能是
與GTSE1的mRNA結(jié)合導致無法翻譯出GTSE1蛋白
與GTSE1的mRNA結(jié)合導致無法翻譯出GTSE1蛋白
。
【答案】平均分為三組,編號甲乙丙,分別加入等量的肝癌細胞株Hep-G2和培養(yǎng)液,同時測定各組中渾濁度和GTSE1蛋白含量;乙組加入等量的5-FU溶液,丙組用siRNA轉(zhuǎn)染后再加入等量的5-FU溶液;
;RNA合成(或轉(zhuǎn)錄);DNA復制;與GTSE1的mRNA結(jié)合導致無法翻譯出GTSE1蛋白