R-7是家蠶體內(nèi)的一種小分子非編碼RNA,可與某些mRNA尾端的一段非編碼序列(3'-UTR)結(jié)合,進(jìn)而影響基因的表達(dá)。為研究R-7是否影響家蠶基因B(調(diào)控家蠶眼睛發(fā)育)的表達(dá),科研人員將基因B中對應(yīng)3'-UTR的DNA片段與熒光素酶基因(該基因的表達(dá)不受R-7的影響)重組,如圖甲所示,將該重組載體導(dǎo)入家蠶胚胎細(xì)胞并觀察其表達(dá),結(jié)果如圖乙所示。請回答下列問題:
(1)基因工程中限制性內(nèi)切核酸酶切割后產(chǎn)生的片段,其末端類型有
黏性末端
黏性末端
和 平末端
平末端
。
(2)圖甲中對應(yīng)3'-UTR的DNA片段應(yīng)插入到位點(diǎn) 2
2
,原因是 目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間,且不能破壞熒光素酶基因
目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間,且不能破壞熒光素酶基因
?;蚬こ痰暮诵牟襟E是 基因表達(dá)載體的構(gòu)建
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
,其目的是 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并可以遺傳給下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用
使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并可以遺傳給下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用
。
(3)科研人員從圖乙所示的實驗組和對照組細(xì)胞中提取蛋白質(zhì),經(jīng)處理檢測后獲得相對熒光值(在適宜條件下,熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應(yīng)并發(fā)出熒光)。實驗組為將重組載體導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中,對照組1為將含有熒光素酶基因的表達(dá)載體(不含對應(yīng)3'-UTR的DNA片段)導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中,則對照組2應(yīng)為 將重組載體導(dǎo)入不含(或去除)R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中
將重組載體導(dǎo)入不含(或去除)R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中
,由結(jié)果可推知R-7通過 與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3'-UTR結(jié)合
與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3'-UTR結(jié)合
進(jìn)而抑制基因B的表達(dá)。