科研人員構(gòu)建了可表達(dá)J-V5融合蛋白的重組質(zhì)粒并進(jìn)行了檢測,該質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)如圖甲所示,其中V5編碼序列表達(dá)標(biāo)簽短肽V5。
(1)與圖甲中啟動子結(jié)合的酶是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
。除圖甲中標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外,作為載體,質(zhì)粒還需具備的結(jié)構(gòu)有
標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)
標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)
(答出2個結(jié)構(gòu)即可)。
(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒后,為了確定J基因連接到質(zhì)粒中且插入方向正確,需進(jìn)行PCR檢測,若僅用一對引物,應(yīng)選擇圖甲中的引物
F1、R2或F2、R1
F1、R2或F2、R1
。已知J基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈位于b鏈,由此可知引物F1與圖甲中J基因的
a鏈
a鏈
(填“a鏈”或“b鏈”)相應(yīng)部分的序列相同。
(3)重組質(zhì)粒在受體細(xì)胞內(nèi)正確表達(dá)后,用抗J蛋白抗體和抗V5抗體分別檢測相應(yīng)蛋白是否表達(dá)以及表達(dá)水平,結(jié)果如圖乙所示。其中,出現(xiàn)條帶1證明細(xì)胞內(nèi)表達(dá)了
J-V5融合蛋白
J-V5融合蛋白
,條帶2所檢出的蛋白
不是
不是
(填“是”或“不是”)由重組質(zhì)粒上的J基因表達(dá)的。