番茄紅素具有一定的藥用價(jià)值，但普通番茄合成的番茄紅素易發(fā)生轉(zhuǎn)化（如圖甲），科學(xué)家設(shè)計(jì)了一種重組DNA（質(zhì)粒三），該DNA能表達(dá)出雙鏈RNA（發(fā)卡），番茄細(xì)胞能識(shí)別侵入的雙鏈RNA并將該雙鏈RNA及其具有相同序列的單鏈RNA一起降解，從而提高果實(shí)中番茄紅素的含量（如圖乙）．請(qǐng)分析回答下列問題：

（1）在體外快速大量獲得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用

PCR

PCR

技術(shù)，該技術(shù)的原理是

DNA半保留復(fù)制

DNA半保留復(fù)制

（2）根據(jù)甲圖推知，轉(zhuǎn)錄出“發(fā)卡”的DNA片段實(shí)際上是兩個(gè)反向連接的

番茄紅素環(huán)化酶

番茄紅素環(huán)化酶

基因，上述過程通過阻止該基因在細(xì)胞內(nèi)的

翻譯

翻譯

（填“轉(zhuǎn)錄”或“翻譯”），提高了果實(shí)中番茄紅素的含量．
（3）為保證圖中的片段A反向連接，處理已開環(huán)質(zhì)粒所用的兩種限制酶是

Ecl、BamHⅠ

Ecl、BamHⅠ

（4）去磷酸化是去掉粘性末端最外側(cè)游離的磷酸基團(tuán)．對(duì)已開環(huán)的質(zhì)粒二兩端去磷酸化的主要作用是阻止其

自身成環(huán)（自身環(huán)化）

自身成環(huán)（自身環(huán)化）

，該DNA分子仍可以和目的基因連接，形成缺少

2

2

個(gè)磷酸二酯鍵的重組質(zhì)粒，隨后在細(xì)胞中被修復(fù)．
（5）可利用

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

法將質(zhì)粒三導(dǎo)入植物細(xì)胞．