突尼斯軟籽石榴是一種熱門水果，深受大家喜愛，但其抗寒能力差，這成為限制該種石榴栽培的重要因素?？茖W(xué)家們利用基因工程對其進行定向改造，以得到抗寒性強的優(yōu)良品種。如圖表示構(gòu)建基因表達載體的方法，圖中標(biāo)注的是限制酶的酶切位點，請回答下列問題：
（1）在切割目的基因時選擇的兩種限制酶最好為SmaI和PstISmaI和PstI，選擇兩種限制酶的優(yōu)勢是可避免質(zhì)粒自身成環(huán)和質(zhì)粒與目的基因的反向連接質(zhì)粒自身成環(huán)和質(zhì)粒與目的基因的反向連接。
（2）可通過PCRPCR技術(shù)對獲得的抗寒基因進行體外擴增，該過程使DNA解旋的方法與細胞內(nèi)復(fù)制時的差異是體外擴增目的基因利用加熱至90～95℃的高溫使DNA解旋，細胞內(nèi)復(fù)制目的基因使用解旋酶使DNA解旋體外擴增目的基因利用加熱至90～95℃的高溫使DNA解旋，細胞內(nèi)復(fù)制目的基因使用解旋酶使DNA解旋，體外擴增時使用的酶具有的顯著特點是耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）。
（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入經(jīng)脫分化脫分化（過程）培養(yǎng)成的軟籽石榴的愈傷組織中常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】SmaI和PstI；質(zhì)粒自身成環(huán)和質(zhì)粒與目的基因的反向連接；PCR；體外擴增目的基因利用加熱至90～95℃的高溫使DNA解旋，細胞內(nèi)復(fù)制目的基因使用解旋酶使DNA解旋；耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）；脫分化；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：23引用：3難度：0.6
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1．紅細胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團隊采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟收入。我國科研團隊研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ）
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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