土壤鹽漬化影響水稻生長發(fā)育??蒲腥藛T將水稻耐鹽堿基因OsMYB56導(dǎo)入不耐鹽堿水稻品種吉粳88中,培育出了耐鹽堿水稻新品種。其操作流程及可能用到的限制酶如圖所示,圖中Bar為抗除草劑基因,Ampr為氨芐青霉素抗性基因,Tetr為四環(huán)素抗性基因。請分析回答:
限制酶 |
SacⅠ |
SmaⅠ |
BamHⅠ |
BclⅠ |
識別序列和切割位點 |
-GAGCT↓C- |
-CCC↓GGG- |
-G↓GATCC- |
-T↓GATCA- |
(1)過程①利用PCR技術(shù)擴增并改造OsMYB56基因需要添加引物,為了構(gòu)建基因表達載體時用相同限制酶切割后的質(zhì)粒和OsMYB56基因能正確連接,應(yīng)選用的引物組合為
B
B
。
A.5’-CCCGGG…-3’和5’-GGATCC…-3’
B.5’-GAGCTC…-3’和5’-GGATCC…-3’
C.5’-GAGCTC…-3’和5’-TGATCA…-3’
D.5’-CCCGGG…-3’和5’-TGATCA…-3’
(2)根據(jù)基因表達載體的結(jié)構(gòu)組成分析,Ti質(zhì)粒中的CaMV 53S是
啟動子
啟動子
。
(3)為篩選出含重組T-DNA的水稻愈傷組織細胞,應(yīng)在添加
除草劑
除草劑
的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)。誘導(dǎo)水稻愈傷組織細胞再分化發(fā)育成植株的培養(yǎng)過程中,
需要
需要
(填“需要”或“不需要”)給予光照。
(4)為確定轉(zhuǎn)基因耐鹽堿水稻是否培育成功,可用
一定濃度的鹽水澆灌
一定濃度的鹽水澆灌
方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽堿性。經(jīng)檢測,科研人員發(fā)現(xiàn)部分獲得耐鹽堿基因OsMYB56的水稻幼菌不具有耐鹽堿能力,原因可能是
雖然獲得了相應(yīng)的基因,但耐鹽基因OsMYB56轉(zhuǎn)錄或翻譯異常(或耐鹽基因OsMYB56表達異常)
雖然獲得了相應(yīng)的基因,但耐鹽基因OsMYB56轉(zhuǎn)錄或翻譯異常(或耐鹽基因OsMYB56表達異常)
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