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新冠疫情后,病毒核酸檢測和疫苗接種在疫情防控中發(fā)揮了重要作用,回答下列問題。
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)新冠病毒是一種RNA病毒,檢測新冠病毒RNA(核酸檢測)可以采取RT-PCR法,該過程中需要用到的酶有
逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶
逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶
。
(2)為了確保新冠病毒核酸檢測的準(zhǔn)確性,在設(shè)計PCR引物時必須依據(jù)新冠病毒RNA中的來進(jìn)行。據(jù)圖1分析,選擇的引物是
Ⅱ、Ⅲ
Ⅱ、Ⅲ
。其作用是
使TaqDNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
使TaqDNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
。
(3)下表是SARS-CoV-2核酸檢測時PCR儀參數(shù)設(shè)定要求;
步驟 a、病毒cDNA合成 b、預(yù)變性 c、變性 d、?
溫度 50℃ 95℃ 95℃ 60℃
時間 15min 5min 5s 40s
循環(huán) 1 1 45
①步驟a的反應(yīng)時間要足夠長,其目的是
保證樣本中病毒RNA均能逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA
保證樣本中病毒RNA均能逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA
。
②步驟d的主要包括PCR過程的
復(fù)性、延伸
復(fù)性、延伸
階段。
(4)PCR的產(chǎn)物一般通過電泳來鑒定,結(jié)果如圖2所示。1號泳道為標(biāo)準(zhǔn)(Marker),2號泳道為陽性對照(提純的目的基因片段),3號泳道為實驗組。標(biāo)準(zhǔn)(Marker)的實質(zhì)為不同已知長度的DNA片段混合物:3號泳道的若出現(xiàn)雜帶,原因一般有
模板受到污染;引物的特異性不強(qiáng);復(fù)性溫度偏低;Mg2+濃度過高等
模板受到污染;引物的特異性不強(qiáng);復(fù)性溫度偏低;Mg2+濃度過高等
(至少答出兩點(diǎn))。
(5)某人同時進(jìn)行了新冠病毒核酸檢測和抗體檢測(檢測體內(nèi)是否有新冠病毒抗體),若核酸檢測結(jié)果為陰性而抗體檢測結(jié)果為陽性,說明
曾經(jīng)感染過新冠病毒但已康復(fù)
曾經(jīng)感染過新冠病毒但已康復(fù)
(答出1種情況即可);若核酸檢測結(jié)果為陽性而抗體檢測為陰性,說明
己感染新冠病毒,還未康復(fù)
己感染新冠病毒,還未康復(fù)
。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶;Ⅱ、Ⅲ;使TaqDNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸;保證樣本中病毒RNA均能逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA;復(fù)性、延伸;模板受到污染;引物的特異性不強(qiáng);復(fù)性溫度偏低;Mg2+濃度過高等;曾經(jīng)感染過新冠病毒但已康復(fù);己感染新冠病毒,還未康復(fù)
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:8引用:2難度:0.5
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    發(fā)布:2024/11/13 7:30:1組卷:10引用:4難度:0.7
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    發(fā)布:2024/11/15 2:30:2組卷:51引用:3難度:0.7
  • 3.新型冠狀病毒的檢測方法目前主要有核酸檢測和抗體檢測?,F(xiàn)在的病毒核酸檢測試劑盒,多數(shù)采用熒光定量PCR方法。檢測原理就是以病毒獨(dú)特的基因序列為檢測靶標(biāo),通過PCR擴(kuò)增,使我們選擇的這段靶標(biāo)DNA序列指數(shù)級增加,每一個擴(kuò)增出來的DNA序列,都可與我們預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號,擴(kuò)增出來的靶基因越多,累積的熒光信號就越強(qiáng)。而沒有病毒的樣本中,由于沒有靶基因擴(kuò)增,因此就檢測不到熒光信號增強(qiáng)。下列說法錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/15 12:0:1組卷:14引用:4難度:0.7
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