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B基因存在于水稻基因組中，其在體細胞和精子中正常表達，在卵細胞中不轉錄。為研究B基因表達對卵細胞的影響，設計并完成了如圖實驗來獲取能夠在卵細胞中表達B基因的轉基因植株。請回答下列問題：
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注：Luc基因表達的熒光素酶能催化熒光素產生熒光
（1）圖中所示的基因表達載體需含有啟動子，它是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
 識別并結合的位點。
（2）可利用
水稻體細胞或精子
水稻體細胞或精子
中的RNA構建cDNA文庫，從中獲得B基因中編碼蛋白的序列。將該序列與Luc基因連接成融合基因（表達的蛋白質能保留兩種蛋白質各自的功能），然后構建基因表達載體。與基因組文庫相比，cDNA文庫的基因數相對較少，原因是
cDNA文庫是用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA反轉錄產生的cDNA片段構建而成的，因此只含有該種生物的一部分基因（已轉錄的基因）；而基因組文庫含有該生物的全部基因
cDNA文庫是用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA反轉錄產生的cDNA片段構建而成的，因此只含有該種生物的一部分基因（已轉錄的基因）；而基因組文庫含有該生物的全部基因
。
（3）基因工程操作的核心步驟是
構建基因表達載體
構建基因表達載體
。
（4）要判斷T-DNA是否整合到水稻細胞染色體DNA上，可采用
DNA分子雜交
DNA分子雜交
的方法進行檢測。
（5）可以通過檢測加入
熒光素
熒光素
后該植株卵細胞中是否發(fā)出熒光，鑒定和篩選出能表達B基因的轉基因植株。

【答案】RNA聚合酶；水稻體細胞或精子；cDNA文庫是用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA反轉錄產生的cDNA片段構建而成的，因此只含有該種生物的一部分基因（已轉錄的基因）；而基因組文庫含有該生物的全部基因；構建基因表達載體；DNA分子雜交；熒光素
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有，未經書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：40引用：5難度：0.7
相似題

  • 菁優(yōu)網1．限制酶a、限制酶b能將某線性DNA分子片段切割，其識別序列和切割位點如圖所示。下列敘述錯誤的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/10 15:30:3組卷：21引用：5難度：0.7

  • 2．中國甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關鍵酶基因（PDC）密切相關，推測澀味程度可能與PDC基因的表達情況有關。
    （1）啟動子位于基因首端，是RNA聚合酶識別和結合的位點，同時啟動子區(qū)域還存在著許多調控蛋白的結合位點，RNA聚合酶和調控蛋白共同影響了基因的
     
    。
    （2）為篩選PDC基因的調控蛋白，科研人員進行了下列實驗。
    ①PDC基因的啟動子序列未知，為獲得大量該基因啟動子所在片段，可利用限制酶將基因組DNA進行酶切，然后在
     
    的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游，根據
     
    和PDC基因編碼序列設計引物進行PCR.利用質粒A（圖1）構建含有PDC基因啟動子片段的重組質粒并導入代謝缺陷型酵母菌，用不含
     
    的培養(yǎng)基可篩選出成功轉化的酵母菌Y1H。
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    ②質粒G（圖2）上的AD基因表達出的AD蛋白與啟動子足夠靠近時，能夠激活后續(xù)基因轉錄，因此需獲得待測蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選?？蒲腥藛T從中國甜柿中提取RNA，將逆轉錄形成的各種cDNA與質粒G連接后導入酵母菌，此時應選擇質粒G中的位點
     
    （填序號1～5）作為cDNA的插入位點，最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
    ③重組酵母Y187與Y1H能夠進行接合生殖，形成的接合子含有兩種酵母菌質粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔子素的培養(yǎng)基中生存，則推測待測蛋白是PDC基因的調控蛋白，請結合圖示闡述作出該推測的理由。

    發(fā)布：2024/11/11 0:0:2組卷：82引用：2難度：0.7

  • 3．某一質粒載體如圖甲所示，Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tett表示四環(huán)素抗性基因。有人將此質粒載體用BamHⅠ酶切后，與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進行連接反應，用得到的混合物直接轉化后得到多種大腸桿菌，并利用培養(yǎng)基乙和丙篩選出導入重組質粒的大腸桿菌。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網

    發(fā)布：2024/11/10 9:0:1組卷：59引用：4難度：0.6
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