鈣依賴蛋白激酶(CDPK)在植物的信號傳導(dǎo)和提高植物抗性方面發(fā)揮著重要作用??茖W(xué)家通過將CDPK基因?qū)霐M南芥(雙子葉植物)中,來獲得具有抗性的新品種。如圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體和含CDPK基因的DNA片段示意圖,圖中標(biāo)記了限制酶的切割位點。據(jù)此回答下列問題:
(1)通過基因工程,將CDPK基因?qū)霐M南芥中,獲得具有抗性的新品種的育種原理是 基因重組基因重組。為了使CDPK基因插人質(zhì)粒中,應(yīng)選取 SmalI和XbaISmalI和XbaI(兩種限制性核酸內(nèi)切酶)分別切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段。
(2)利用PCR可獲得大量的CDPK基因,PCR擴(kuò)增的第一步:用微量移液器在微量離心管中加入緩沖液、4種脫氧核苷酸的等量混合液、水、還需要加入 TaqDNA聚合酶,兩種引物和模板DNATaqDNA聚合酶,兩種引物和模板DNA。PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂凝膠電泳來鑒定,在凝膠中的DNA分子的遷移速率 凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象有關(guān)。
(3)將CDPK基因?qū)霐M南芥細(xì)胞通常采用的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。
(4)檢測CDPK基因是否成功表達(dá)的方法是 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交,若有雜交帶出現(xiàn),表明已產(chǎn)生了CDPK。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】基因重組;SmalI和XbaI;TaqDNA聚合酶,兩種引物和模板DNA;凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;抗原—抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:5引用:1難度:0.7
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