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鈣依賴蛋白激酶(CDPK)在植物的信號傳導(dǎo)和提高植物抗性方面發(fā)揮著重要作用??茖W(xué)家通過將CDPK基因?qū)霐M南芥(雙子葉植物)中,來獲得具有抗性的新品種。如圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體和含CDPK基因的DNA片段示意圖,圖中標(biāo)記了限制酶的切割位點。據(jù)此回答下列問題:
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(1)通過基因工程,將CDPK基因?qū)霐M南芥中,獲得具有抗性的新品種的育種原理是
基因重組
基因重組
。為了使CDPK基因插人質(zhì)粒中,應(yīng)選取
SmalI和XbaI
SmalI和XbaI
(兩種限制性核酸內(nèi)切酶)分別切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段。
(2)利用PCR可獲得大量的CDPK基因,PCR擴(kuò)增的第一步:用微量移液器在微量離心管中加入緩沖液、4種脫氧核苷酸的等量混合液、水、還需要加入
TaqDNA聚合酶,兩種引物和模板DNA
TaqDNA聚合酶,兩種引物和模板DNA
。PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂凝膠電泳來鑒定,在凝膠中的DNA分子的遷移速率
凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象
凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象
有關(guān)。
(3)將CDPK基因?qū)霐M南芥細(xì)胞通常采用的方法是
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
。
(4)檢測CDPK基因是否成功表達(dá)的方法是
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
,若有雜交帶出現(xiàn),表明已產(chǎn)生了CDPK。

【答案】基因重組;SmalI和XbaI;TaqDNA聚合酶,兩種引物和模板DNA;凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;抗原—抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:5引用:1難度:0.7
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    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項)等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對目的基因進(jìn)行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號)。過程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
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    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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