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鈣依賴蛋白激酶（CDPK）在植物的信號傳導(dǎo)和提高植物抗性方面發(fā)揮著重要作用?？茖W(xué)家通過將CDPK基因?qū)霐M南芥（雙子葉植物）中，來獲得具有抗性的新品種。如圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體和含CDPK基因的DNA片段示意圖，圖中標(biāo)記了限制酶的切割位點。據(jù)此回答下列問題：
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（1）通過基因工程，將CDPK基因?qū)霐M南芥中，獲得具有抗性的新品種的育種原理是
基因重組
基因重組
。為了使CDPK基因插人質(zhì)粒中，應(yīng)選取
SmalI和XbaI
SmalI和XbaI
（兩種限制性核酸內(nèi)切酶）分別切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段。
（2）利用PCR可獲得大量的CDPK基因，PCR擴(kuò)增的第一步：用微量移液器在微量離心管中加入緩沖液、4種脫氧核苷酸的等量混合液、水、還需要加入
TaqDNA聚合酶，兩種引物和模板DNA
TaqDNA聚合酶，兩種引物和模板DNA
。PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂凝膠電泳來鑒定，在凝膠中的DNA分子的遷移速率
凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象
凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象
有關(guān)。
（3）將CDPK基因?qū)霐M南芥細(xì)胞通常采用的方法是
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
。
（4）檢測CDPK基因是否成功表達(dá)的方法是
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
，若有雜交帶出現(xiàn)，表明已產(chǎn)生了CDPK。

【答案】基因重組；SmalI和XbaI；TaqDNA聚合酶，兩種引物和模板DNA；凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；抗原—抗體雜交
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：5引用：1難度：0.7
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達(dá)。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當(dāng)復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　　）

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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