北極比目魚中有抗凍基因,下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖,請回答:

(1)利用過程①的方法構建的基因文庫是 部分基因文庫(cDNA文庫)部分基因文庫(cDNA文庫),除了從基因文庫中獲取目的基因以外,常用的獲取目的基因的方法還有 利用PCR技術擴增利用PCR技術擴增和 人工合成人工合成。
(2)過程②中常需要使用限制酶和DNA連接酶,既能連接黏性末端又能連接平末端的DNA連接酶是 T4DNA連接酶T4DNA連接酶。
(3)此題中將目的基因?qū)胧荏w細胞的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。
(4)為使過程①獲取的目的基因在番茄細胞中能夠表達,在構建表達載體時,需要將目的基因插入 Ti質(zhì)粒的T-DNATi質(zhì)粒的T-DNA,并且需在目的基因的首端和尾端分別加入 啟動子啟動子,終止子終止子。
(5)要檢測番茄的DNA上是否插入抗凍基因,應以 用放射性同位素標記的目的基因用放射性同位素標記的目的基因為探針,與番茄基因組DNA雜交;要確認抗凍基因是否在轉(zhuǎn)基因番茄植株中正確表達,應通過 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交法檢測轉(zhuǎn)基因番茄植株中該基因的表達產(chǎn)物是否呈陽性。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】部分基因文庫(cDNA文庫);利用PCR技術擴增;人工合成;T4DNA連接酶;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;Ti質(zhì)粒的T-DNA;啟動子;終止子;用放射性同位素標記的目的基因;抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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