黃瓜花葉病毒(CMV)是能侵染多種植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生長并造成減產(chǎn)。研究人員通過農(nóng)桿菌介導將該病毒外殼蛋白的cDNA導入番茄植株中,成功獲得抗CMV的番茄植株。
(1)獲得CMV的RNA后,在
逆轉錄
逆轉錄
的催化下才能合成CMV外殼蛋白的cDNA。
(2)獲得cDNA后,需先通過一定方法將其插入到農(nóng)桿菌的
T-DNA
T-DNA
片段中,然后將番茄子葉切段與該農(nóng)桿菌共同培養(yǎng),以實現(xiàn)對番茄細胞的轉化。
(3)將經(jīng)共同培養(yǎng)后的番茄外植體接種于含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間,只有部分外植體生出愈傷組織。研究人員據(jù)此確定這些生出愈傷組織的外植體都已成功導入了cDNA,你認為他們做出以上判斷的理由是
重組表達載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功導入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織 再分化
重組表達載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功導入了重組質(zhì)粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養(yǎng)基上生出愈傷組織 再分化
。
(4)要想確定轉基因番茄已經(jīng)成功表達出CMV外殼蛋白,需要進行
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
實驗。
(5)若要驗證轉基因番茄具有較好的抗CMV能力,請寫出實驗設計思路
用強致病力的CMV分別感染轉基因番茄與未轉基因的番茄,通過對照發(fā)現(xiàn)轉基因番茄具有較好的抗CMV能力
用強致病力的CMV分別感染轉基因番茄與未轉基因的番茄,通過對照發(fā)現(xiàn)轉基因番茄具有較好的抗CMV能力
。
轉基因番茄自交,子代中抗性植株與敏感植株數(shù)量之比接近3:1,由此可以得出的結論是
目的基因已經(jīng)整合到受體細胞的染色體上
目的基因已經(jīng)整合到受體細胞的染色體上
、
獲得的轉基因親本為雜合子
獲得的轉基因親本為雜合子
(答出兩點)。